脓毒症患者外周血鞭毛蛋白含量及单个核细胞TLR5 mRNA表达的测定与意义

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急性呼吸窘迫综合征是脓毒症的重要并发症。一般认为,脂多糖(LPS)释放入血,在肺部引起播散性的炎症反应,最后导致肺泡及毛细血管膜的损伤。在革兰氏阴性杆菌所致脓毒症中,是否还有其他的细菌毒素在起作用呢?近年研究表明,细菌鞭毛的主要成分鞭毛蛋白,在脓毒症中,可通过Toll样受体5(TLR5)引起急性炎症反应。本实验在本研究所既往离体及动物实验研究的基础上,通过测定脓毒症患者外周血鞭毛蛋白的含量及TLR5表达水平的变化,进一步探讨鞭毛蛋白在脓毒症并发急性肺损伤(ALI)中的作用及机制,为ALI的防治提供新的理论及实验依据。方法:按照1992年美国胸科医师学会(ACCP)和危重病学会(SCCM)提出的脓毒症诊断标准:感染+SIRS(≥2项),选取经检验科体液培养证实为G-杆菌所致脓毒症患者(G-菌组)14例, G+球菌所致脓毒症患者(G+菌组)8例,正常对照组为健康人9例。SIRS的诊断标准为:①体温>38.3℃或<36℃;②心率>90/min ;③呼吸>20/min, PaCO2<32mmHg;④WBC>12×109/L或<4.0×109/L或核左移>10%。外周血鞭毛蛋白含量的检测采用ELISA法。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,以BIOzol提取液提取外周血单个核细胞总RNA,用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞TLR5 mRNA表达的变化,用t检验进行统计分析。结果:G+菌组、正常对照组的外周血中未检测到鞭毛蛋白,G-菌组的外周血鞭毛蛋白含量为6.636±5.147ng/ml;G-菌组的TLR mRNA表达水平较G+菌组、正常对照组显著升高(P<0.01),G+菌组与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:鞭毛蛋白可能通过TLR5参与脓毒症致急性肺损伤的发生、发展。
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