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第一部分 自体骨骼肌卫星细胞移植治疗心肌梗死的研究 第一节 骨骼肌卫星细胞的分离、培养及鉴定 目的:探讨骨骼肌卫星细胞的分离、培养及鉴定方法。方法:无菌条件下从幼猪三角肌群处切取骨骼肌标本5—10g,采用胶原酶和透明质酸酶消化的方法获取骨骼肌卫星细胞,进行体外培养、扩增,并观察所培养细胞的形态;降低培养液中胎牛血清浓度,观察肌管形成;免疫组化的方法检测Desmin的表达;RT—PCR法检测细胞肝细胞生长因子受体c-met的表达。结果:卫星细胞在体外生长、增殖良好,刚分离出的卫星细胞呈球形,折光性强,12小时后开始贴壁,仍为圆形,48小时后贴壁完全,细胞呈梭形,生长缓慢。随时间延长,细胞增殖、迁移逐渐有规律地平行排列。降低细胞培养液中胎牛血清浓度至2%,卫星细胞可融合成肌管,免疫组化显示培养的细胞Desmin阳性,这些细胞表达c-met。结论:酶消化法是一种适合的卫星细胞的培养方法。 第二节 自体骨骼肌卫星细胞移植修复心肌梗死后心肌损伤的实验研究 目的:研究骨骼肌卫星细胞植入梗死区组织后的转归及其对心肌损伤的修复作用。方法:幼猪10只,对照组和治疗组各5只,治疗组从幼猪三角肌群处切取骨骼肌标本,获取卫星细胞,体外培养、扩增,