论文部分内容阅读
目的:热量限制(Caloric restriction, CR)又称为饮食限制(Dietary restriction, DR),是指在提供主要营养成分如必需氨基酸、维生素等,保证生物体基本营养需要的前提下,通过减少食物中摄入的脂肪或糖类以限制每日摄取的总热量(一般是将正常自由进食所得热量减去30%~40%)。1935年美国康奈尔大学营养学家McCay等发现通过生长期限制热量的摄入可以延长大鼠的寿命。目前,CR已成为医学与生物学领域研究的热点。20世纪80年代,Weindruch等在CR的大鼠模型中,观察了近300种与年龄老化有关的生理指标变化,发现CR对其中绝大部分指标的变化具有延缓作用,其中包括了行为、学习能力、基因表达、酶活性、免疫功能等多个方面。亦有研究显示CR可以延缓免疫功能的衰退而起到延缓衰老的作用。Walford(1974)根据CR延长寿命是由于延缓免疫衰退而起作用的假说,首先经实验证实,CR能使小鼠免疫系统的成熟延迟,免疫衰退延缓。姜黄在我国作为药用已有1000多年的历史,姜黄的主要有效成分是姜黄素,我国传统医学认为它具有活血化瘀、行气止痛的功效,近年研究结果表明姜黄还显示出较强的抗炎、抗肿瘤及免疫调节等活性。免疫球蛋白是机体抗感染的重要屏障,在人体的免疫功能中发挥着重要作用,IgA、IgG、IgM是其最主要的成分。本实验研究通过检测成年SD大鼠不同热量及加入中药姜黄饲料喂养后3个月,血清及脾脏组织匀浆中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平及免疫器官指数的变化,以探讨CR及姜黄对大鼠免疫功能的影响。方法:选取清洁级健康雄性成年SD大鼠46只,随机分为4组:I组(普通饲料组,即对照组)12只、II组(高热量组)12只、III组(限制热量组,即CR组)12只及IV组(高热量+姜黄组)10只。实验初各组之间体重比较无显著性差异。实验进行到90天时,在10%水合氯醛麻醉下,经下腔静脉采血留取标本后经股动脉放血处死。剖腹取脾脏,经冰生理盐水冲洗,滤纸吸干后,进行称重,计算脾指数,即免疫器官指数。取脾脏组织制备成10%组织匀浆,以2400转/分离心10分钟,提取上清液;取静脉血标本以2000转/分离心10分钟,提取血清,分别采用放射免疫法检测IgA、IgG含量,采用酶联免疫法检测IgM含量。应用The SAS System for Windows V8统计软件建立数据库,对所得数据进行统计分析。所有计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间均数进行方差齐性检验和单因素方差分析;两组间比较采用两样本均数比较的t检验,以α=0.05作为差异显著性水准,p<0.05具有统计学意义。结果:①大鼠体重变化:饲养前各组大鼠的体重满足方差齐性,各组间体重无显著性差异(p>0.05)。饲养30天后,与对照组相比,II组体重增长显著,III组、IV组体重增长缓慢,差异均具有显著性(p<0.001);饲养60天后,与对照组相比,II组体重增加,但无显著性差异(p>0.05),III组、IV组体重增长缓慢,均具有显著性差异(p<0.001);饲养90天后,与对照组相比,II组体重增加,但无显著性差异(p>0.05),III组、IV组体重增长缓慢,具有显著性差异(p<0.001)。②各组大鼠血清免疫球蛋白水平比较:与对照组比较,II组大鼠血清IgA、IgG、IgM含量增加不明显(p>0.05);III组大鼠血清IgA含量显著增加(p<0.05),血清IgG、IgM含量虽大多有所增加,但无显著性差异(p>0.05);IV组大鼠血清IgA、IgM含量无明显变化(p>0.05),而血清IgG含量明显升高(p<0.05)。与III组相比:II组血清IgA、IgG、IgM含量变化不明显(p>0.05);IV组血清IgA含量普遍降低(p﹤0.05),IgG含量明显增加(p<0.05)血清IgM含量无明显变化(p>0.05)。IV组与II组相比,血清IgA含量降低(p﹤0.05),IgG含量无明显变化(p>0.05),IgM含量显著性增加(p﹤0.05)。③各组大鼠脾组织匀浆中免疫球蛋白水平比较:与对照组比较,II组脾组织匀浆IgA、IgG、IgM含量增加不明显,差异均无显著性(p>0.05);III组大鼠脾组织匀浆IgA、IgG含量虽有所升高,但无显著性差异(p>0.05),IgM含量则明显升高(p<0.05);IV组大鼠脾组织匀浆IgA、IgM含量变化不明显(p>0.05),而IgG含量显著增加(p<0.05)。与III组相比:II组脾组织匀浆IgA含量明显增加(p﹤0.05),IgM含量显著降低(p﹤0.05),IgG含量变化不明显(p>0.05);IV组脾组织匀浆IgA含量无明显变化(p>0.05),IgG含量增加(p<0.05),IgM含量降低(p﹤0.05)。IV组与II组相比,脾组织匀浆IgA、IgG、IgM含量均无显著变化(p>0.05)。④各组免疫器官指数比较:与对照组相比,II组大鼠免疫器官指数变化不明显(p>0.05);III组大鼠免疫器官指数普遍升高(p<0.05);IV组大鼠免疫器官指数升高较明显(p<0.05)。与III组比较,II组免疫器官指数显著降低(p<0.05),IV组大鼠免疫器官指数无明显变化(p>0.05)。IV组与II组比较,免疫器官指数明显升高(p<0.05)。结论:①通过热量限制,能够明显提高大鼠血清IgA含量,而IgG与IgM含量虽有所增加,但差异无统计学意义。②通过热量限制,亦能使脾组织匀浆中IgM含量明显增加,而IgA与IgG含量增加不明显。③热量限制能够显著提高大鼠的免疫器官指数。④通过在高热量饮食中加入姜黄可明显提高大鼠血清及脾组织匀浆中IgG含量及免疫器官指数,而对IgA、IgM影响不明显。⑤高热量组血清IgA含量明显高于高热量+姜黄组,脾组织匀浆IgA含量明显高于热量限制组,似与预期结果不符,其具体机制有待于进一步探讨。