中国卤虫β-catenin基因的序列分析,功能研究及在不同发育时期的表达

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中国卤虫(Artemia sinica)属于节肢动物门(Phylum Arthropoda),甲壳纲(ClassCrustacea),鳃足亚纲(Subclass Branchiopoda),无甲目(Order Anostaca),卤虫科(Famijy Artemiidae),卤虫属(Genus Artemia)。卤虫广泛分布于盐湖、盐井等高盐水体中。因其富含高蛋白和不饱和脂肪酸等丰富的营养物质,因此成为重要的经济饵料。   β-catenin基因是一个在Wnt通路中的非常重要的基因。本研究发现,在卤虫发育的不同阶段,β-catenin基因的表达量有着明显的变化。在胚胎发育的早期,β-catenin基因表达量较高,这于生命活动旺盛,细胞通路间进行物质和信息传递密切相关。   另外,卤虫的滞育卵是暂停发育的原肠胚,这与其他生物的胚胎发育显著不同。卤虫胚胎发育基因的鉴别及功能研究对于胚胎暂停及重新启动的基因调控机制研究有重要意义。本研究首次采用RACE技术获得了2826bp的卤虫β-catenin基因的cDNA全序列,经Omiga2.0和若干在线分析网站的分析,不仅确定该序列为卤虫β-catenin基因(GenBank accession No.:GU289917.1),而且研究了其许多生物学特征。   同时,利用实时定量荧光PCR技术以不同时期卤虫的cDNA为模板进行QRT-PCR,发现β-catenin办基因在胚胎发育早期,表达量较高,但随着时间的推移,表达量逐渐降低。同样,采用实时荧光定量PCR技术,也发现了菌刺激和高盐度都会对β-catenin基因的表达产生影响。表明中国卤虫β-catenin基因也与多种基因的表达有关。β-catenin基因作为Wnt通路的核心可能也参与调控了其他胚胎发育相关基因表达。整体免疫组化结果则说明了β-catenin基因不光与多种胚胎发育相关基因有关,而且它还与细胞黏附作用以及调节细胞周期的重要作用。
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