肝移植已成为终末期肝病的主要治疗手段，供肝的日益短缺已成为制约肝移植发展的瓶颈。近十年来，活体供肝部分肝移植发展迅速，为缓解这一矛盾、扩大供肝池提供了良好的选择。但仍有诸多问题有待解决，如移植肝的活性、移植肝与受体的匹配、术后缺血再灌注损伤、免疫抑抑制药物的应用以及移植肝的再生和影响因素等。生长激素是19世纪20年代发现的由垂体分泌的激素，自80年代中期始重组人生长激素(rhGH)逐渐取代天然提取的生长激素，广泛应用于严重的烧伤、外科严重感染、大手术及严重创伤患者。多年的研究发现，生长激素能促进蛋白质合成，增强钠、钾、钙、磷、硫等重要元素的摄取与利用，同时通过抑制糖的消耗，加速脂肪分解，使能量来源由糖代谢向脂肪代谢转移，有利于机体的生长与修复过程。近年来，生长激素对肝脏再生的调节作用备受重视。有研究认为，生长激素通过对肝细胞的基因表达、酶的活性和肝再生各种因子含量的调节影响肝细胞增殖、再生过程。尽管肝再生的研究已经进行了将近一个世纪，对肝再生的信号转导途径有了一定的了解，但这些研究大部分是建立在肝脏部分切除模型的基础上，对小体积肝移植后肝脏再生的信号转导机制所知甚少。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)作为细胞表面信号转导到细胞内部的重要传递者，参与了细胞生长、发育、分裂及细胞间的功能同步等多种重要生理过程而受到广泛的关注。GH通过GHR胞内端特异位点激活细胞内酪氨酸蛋白激酶JAK2(Janus kinase 2)引起一系列信号转导途径活化，其中至今研究最多的主要途径是JAK2／STATs信号途径。近来研究发现，MAPK通路中的生长因子受体结合蛋白2(Grb2)、鸟嘌呤核苷酸交换因子(Sos)和Ras等分子可被GH／GHR激活。但rhGH在小体积肝移植再生中的分子作用机制及其对小体积移植肝再生中MAPK信号转导途径的活性影响，目前国内外未见相关报道。本研究利用大鼠40％小体积肝移植模型，采用rhGH术后治疗，观察不同时间点肝功能、肝再生率，及血清和肝组织中与增殖相关细胞因子、细胞周期蛋白及MAPK信号转导途径蛋白表达情况，探讨比GH对大鼠小体积肝移植肝脏再生及MAPK信号转导机制的影响。材料与方法.研究对象:雄性v汽吕tar大鼠，体重200.2309。.研究方法: 将雄性钻s枉『大鼠随机分成四组。A组:假手术组(开腹后拨动肝脏，不做其它处理， 30min后关腹)。B组:60%肝叶切除组(肝叶切除组)。C组:40%小体积肝移植+生 理盐水组(生理盐水组)。D组:40%小体积肝移植组喇由GH治疗组(由GH治疗组)。 rhGH治疗组大鼠移植术后每天皮下注射比。H IIU欠归;生理盐水组大鼠移植术后每 天皮下注射生理盐水1创几酬。术后1、3、5、7天分别处死各组大鼠，称取肝脏湿重， 计算肝再生率。自股动脉取血全自动生化分析仪检测AIJ、ALB。对肝脏标本进行光 镜、电镜观察。肝组织行PCNA免疫组化和缺口原位末端标记技术(TUNEL)检测。 ELISA分析大鼠血清中n卜6、n妞.Q和TGRp含量。应用盯刃℃R检测大鼠肝组织 中nJ.6、TNF.a、TGF-p、GHR和刀3F-1 mRNA表达。用节海stem Blot检测肝组织中 细胞周期蛋白cycDI、CDK416及MApK信号转导途径中的E又‘，.ERK、刃阿K份.乃服、 P38lP.P38的蛋白表达。3.统计学方法:所有资料以均数士标准差(~士sD)表示，应用SPSS 12.0统计软件， 各时间点组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异具有显著性意义。 结果1.大鼠术后肝脏再生功能评价 术后第1天、第3天肝再生率上升较缓慢，以肝叶切除组的肝再生率较高;三组大鼠的肝再生率在术后第5夭均明显上升，术后第7天达值峰。比GH治疗组术后第5天的肝再生率显著高于生理盐水组，术后第7天的肝再生率则达1 63.9士2.29%，显著高于肝叶切除浙江大学博士学位论文组和生理盐水组。2.术后各组肝功能测定 术后随着观察时点的延长各组大鼠血清ALr值逐渐降低。肝叶切除组至术后第7天ALT值接近恢复正常;生理盐水组与比GH治疗组术后第1天AIJ值显著高于肝叶切除组(P<0 .05)，且两组至术后第7天ALT仍未恢复正常;比GH治疗组术后第5天、第7天All较生理盐水组降低明显(P<0.05)。 与假手术组相比，术后随着观察时点的延长印%肝叶切除组、4O%小体积肝移植+生理盐水组和肝移植刹由GH治疗组各组大鼠血清Al卫值逐渐上升。术后第1天三组的ALB均显著低于假手术组(P<0.05);术后第5天比GH治疗组大鼠血清ALB显著高于生理盐水组(P<0.05)，与肝叶切除组比较无差异;肝叶切除组和比GH治疗组至术后第7天ALB已基本接近正常，而生理盐水组术后ALB恢复较慢。3.组织学观察 术后第1天60%肝叶切除组、40%小体积肝移植+生理盐水组和肝移植+由GH治疗组三组大鼠肝脏IIE染色均可见肝细胞胞浆内大量脂肪滴，尤其以肝叶切除组和生理盐水组为多;部分肝细胞肿胀、气球样变，但肝小叶结构完整。第3天细胞核有丝分裂相渐增多，第5天三组大鼠肝细胞核分裂相均达高峰，比GH治疗组的核分裂相显著多于生理盐水