【摘 要】
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口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease，FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus，FMDV)引起的一种主要危害猪、牛、羊等偶蹄动物的急性、热性传染病。FMDV是单股正链RNA病毒
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口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease，FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus，FMDV)引起的一种主要危害猪、牛、羊等偶蹄动物的急性、热性传染病。FMDV是单股正链RNA病毒，属于微RNA病毒科、口蹄疫病毒属的成员。 3A蛋白是FMDV的非结构蛋白，由153个氨基酸组成，其N端保守而C端易变，C端氨基酸的改变在病毒复制、毒力和嗜性方面起重要作用。先前的研究发现，3A蛋白C端缺失10个或19-20个氨基酸能够影响O型或者C型FMDV在牛源细胞上的复制，而不影响其在猪源细胞上的复制;但是，3A蛋白C端缺失并不影响Asial型FMDV在BHK-21细胞上的复制。然而，3A蛋白C端大片段缺失是否影响O型FMDV复制仍然未知。 为了研究3A蛋白C端大片段缺失是否影响O型FMDV复制，本研究基于O/YS/CHA/05感染性克隆质粒构建了3A蛋白缺失60个氨基酸(84-143aa)的突变株O/YS/CHA/05-△3A。与亲本病毒相比，拯救的病毒O/YS/CHA/05-△3A在BHK-21和IBRS-2细胞上的复制能力下降了约10倍、形成的噬斑更小，表明3A蛋白60个氨基酸的缺失影响了FMDV的复制。可是将O/YS/CHA/05-△3A在BHK-21细胞连续传14代之后，O/YS/CHA/05-△3A-P14的复制能力提升到与亲本病毒相当。序列比对分析发现，O/YS/CHA/05-△3A-P14存在两个氨基酸替换，包括VP1的P153L和2C的T135I，说明它们对于O/YS/CHA/05-△3A-P14复制能力的提升单独或共同起起作用。随后分别将VP1的P153L和2C的T135I突变引入到O/YS/CHA/05-△3A感染性克隆质粒并拯救病毒，发现只有2C的T135I突变能提高O/YS/CHA/05-△3A的复制能力。与此同时，将2C的T135I突变引入到亲本病毒O/YS/CHA/05中，发现该氨基酸替换也能够提高亲本毒的复制能力，说明无论3A蛋白是否缺失，2C蛋白T135I突变均能提高O/YS/CHA/05的复制能力。进一步的研究表明，2C的T135I氨基酸替换是通过提高FMDV的RNA合成水平提高O/YS/CHA/05的复制能力。总之，本研究发现3A蛋白84-143aa缺失降低O/YS/CHA/05的复制，2C蛋白的T135I突变提高O/YS/CHA/05的复制，这也为研究3A蛋白与2C蛋白在口蹄疫病毒复制过程中的协同作用研究提供了思路。
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