基于原子力显微术对干细胞分化与黑色素瘤细胞凋亡的研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhwangseagull
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞的分化是个体发育的一个重要阶段,胚层细胞的分化导致组织形成、器官发生和系统建成,细胞的异常分化会导致癌变。细胞的衰老和凋亡也与人体健康有着极为密切的关系。为了深入了解正常细胞的分化和肿瘤细胞的凋亡,探索细胞分化与凋亡的作用过程和机制,本研究以猪脂肪前体细胞、猪精原干细胞(SSCs)、小鼠黑色素瘤细胞B16为模型,采用原子力显微术(AFM)、激光共聚焦显微术(LSCM)、流式细胞术(FCS)、透射电子显微术(TEM)、CCK-8法及Western-blot等方法,对分化及凋亡过程中细胞的表面形貌、内部结构、力学性能和相关蛋白进行检测,获得了以下具有创新性的成果:1.深入探讨脂肪前体细胞向成熟脂肪细胞分化前后细胞在纳米水平的变化,应用AFM扫描发现细胞核周围出现孔洞,膜表面变得光滑,粗糙度减小颗粒大小降低,膜表面粘附力由(146.33+11.23)PN降低到(119.95+8.67)PN。硬度与杨氏模量方面也降低了约20%,分化后的成熟脂肪细胞膜流动性更强,更易变形。本研究首次获得脂肪前体细胞分化前后细胞的超微结构和力学性能,为理解体内能量平衡和肥胖疾病的发生及诊断提供新的实验依据。2.首次运用AFM研究SSCs的多能性,分析SSCs向脂肪细胞分化后细胞形貌及内部结构、分子的变化。成脂诱导后,SSCs由立体球形变为扁平不规则的圆盘状,贴壁性能提高,内部出现大量脂滴,膜表面粗糙度及颗粒大小增加。粘附力由(47.31士19.75)PN增加至(64.64±1.44)PN,硬度、杨氏模量均升高。TEM扫描得到细胞内部线粒体、内质网及空泡大量增多。完全分化后,成熟脂肪细胞内部特异性分子PPARy与C/EBPa出现。总结来说,我们从定性及定量两个角度表征了SSCs成脂分化所产生的一系列变化。3.以B16细胞为研究对象分析替莫唑胺(TMZ)对其致凋亡作用,发现TMZ对能有效抑制B16细胞的生长,50μMTMZ作用细胞时,凋亡率达到最大为34.6%。随着药物浓度的增加,细胞膜及细胞核都产生不可逆损伤,细胞膜电位、内部Ca2+浓度和Caspase-3蛋白含量也发生相应的变化。此工作首次推断TMZ对B16细胞膜和核的毒性,可能是药物造成细胞死亡的一个机制。综上所述,本课题采用原子力显微术为基础对细胞形貌、超微结构及力学性能变化进行探测,结合生物技术手段对分化及凋亡过程表征,可以直观的看到在这两个重要阶段中细胞的变化,为生命活动的深入研究提供方法和依据。
其他文献
乾嘉以降,朴学大兴。国中学人皆遁宏门正道,于是书学、印学一以汉魏为圭臬。至包世臣《艺舟双楫》、康有为《广艺舟双楫》出,天下云集而景从,书印之声面别开,辽有然也。
皮肤肿瘤的发病率相当高,严重地影响着人民健康乃至生命。根据国外某些肿瘤研究所的统计,皮肤肿瘤按病理诊断结果,病种分布以基底细胞上皮瘤为最高,其次为鳞状细胞癌,再次为
针对氯气有毒、性质检验实验步骤多、易于泄露等不足,可以设计氯气的绿色化制备及性质检验的全封闭实验。其中,在具支试管中制备氯气,实现了药品的微量化;用注射器滴加浓盐酸
选取不同的电源频率,用微弧氧化方法在AZ91D镁合金表面制备一系列陶瓷层,并分别采用扫描电子显微镜、电化学工作站和MS-T3000摩擦磨损试验仪对陶瓷层的形貌、厚度、耐腐蚀性
当初,建设一个“古北新区”一定是有很多深刻含意的,但我宁肯相信,古北新区就是一个国际社区——一个上海滩为数不多的著名的国际社区。大约十几年前,我那位比利时籍女 At t
新公共管理运动在非政府组织的兴起过程中起到重要的促进作用。一方面,西方福利国家危机使非政府组织吸引了更多的注意力;另一方面,新公共管理改革中的私有化改革使非政府组
目的:本实验采用免疫组织化学技术,检测CD44v6与MMP-9在唾液腺的正常组织和各型肿瘤组织中的表达情况及相互联系,以探寻它们的表达在唾液腺肿瘤浸润和转移过程中的作用。方法
<正>2017年5月1日,被誉为"时尚界奥斯卡"的Met Gala(纽约大都会艺术博物馆慈善舞会)在纽约举行,今年的主题是COMME des GARCONS品牌的创始人——日本设计师川久保玲。作为20
<正>《液相色谱分离材料——制备与应用》(化学工业出版社,2016)由欧俊杰、邹汉法等二十余名在色谱领域从事基础研究和应用的专家集体编著而成。背景色谱作为一种分离技术与
本文主要探讨了继承人和受遗赠人清偿遗产债务的责任,以及继承人之间在遗产债务清偿时的连带责任,并提出了建议.