【摘 要】
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目的:缺氧缺血性脑损伤（HIBD）是导致婴幼儿急性死亡和神经元凋亡的主要原因。ODN（Octadecaneuro peptide）是一种来自地西泮结合抑制剂（diazepam-binding inhibitor,DBI）的多肽,具有抗氧化作用,主要通过星形胶质细胞表达。然而,ODN是否对HIBD处理后的大鼠具有神经保护作用尚不清楚。本研究的目的是探究ODN在HIBD中的作用及其相关机制。方法:（1
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目的:缺氧缺血性脑损伤（HIBD）是导致婴幼儿急性死亡和神经元凋亡的主要原因。ODN（Octadecaneuro peptide）是一种来自地西泮结合抑制剂（diazepam-binding inhibitor,DBI）的多肽,具有抗氧化作用,主要通过星形胶质细胞表达。然而,ODN是否对HIBD处理后的大鼠具有神经保护作用尚不清楚。本研究的目的是探究ODN在HIBD中的作用及其相关机制。方法:（1）对出生七天的SD大鼠建立HIBD模型,收取sham（3h,24h,3d,7d）以及HIBD（3h,6h,12h,24h,3d,7d）大鼠脑组织,Western Blot和免疫荧光检测ODN前体分子DBI在HIBD后的表达变化情况。（2）将同窝出生的七日龄SD大鼠随机均匀分为sham+saline组,sham+ODN组,HIBD+saline组,HIBD+ODN组,对sham+saline组和HIBD+saline组连续七天侧脑室注射2μl saline,对sham+ODN组和HIBD+ODN组连续七天侧脑室注射2μl ODN（5μg/ml）。（3）HIBD模型建立后2d取左侧脑组织,匀浆后使用氧化应激分析试剂盒进行氧化应激分析（活性氧,过氧化氢,过氧化氢酶,总一氧化氮合酶,谷胱甘肽还原酶,总抗氧化能力）。（4）模型建立三周后开始进行行为学检测,包括抓力,转棒和Morris水迷宫实验,行为学实验结束取相应脑组织进行免疫组织化学实验。结果:（1）Western Blot结果和免疫荧光结果显示,DBI表达在HIBD中呈时间依赖性变化,在HIBD后24h和3d显著降低,在HIBD后7d时恢复到正常水平。（2）抓力和转棒实验结果显示ODN可以恢复HIBD大鼠的肌力和运动平衡能力。（3）Morris水迷宫实验结果显示,HIBD大鼠逃逸潜伏期明显增加,ODN治疗后可以显著缩短HIBD大鼠的逃避潜伏期,同时HIBD组在记忆提取中穿越平台区域次数明显减少,而ODN治疗后显著增加了HIBD大鼠的穿越平台次数。（4）免疫组织化学实验结果显示,HIBD处理后,海马（CA1区和CA3区）和皮层神经元均明显减少,ODN治疗后具有一定的恢复作用。（5）氧化应激分析结果表明,HIBD造模后,大鼠大脑左侧半球中活性氧水平显著上升,促氧化应激因子过氧化氢,总一氧化氮合酶显著上升,抗氧化应激因子总抗氧化能力,谷胱甘肽还原酶和过氧化氢酶显著下降。结论:总之,我们的结果清楚地表明,ODN通过减少ROS的产生减轻神经元损伤和运动和记忆缺陷,可能作为一种新的分子治疗HIBD。
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