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荷叶(Folium nelumbinis)是睡莲科植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)的叶片,在我国分布范围广泛,具有安全、无毒副作用特点。现代研究表明,荷叶中含有丰富的多酚类、黄酮类、酚酸类及生物碱类等生物活性物质,具有良好的清除自由基、抑菌消炎、抗肿瘤、降脂减肥及防治心脑血管疾病等作用。目前,由这种源于自然,安全无害的植物开发出的食品、药品及化妆品等正越来越受到人们的青睐。然而,荷叶资源在我国并没有得到有效应用,每年仅有约1%荷叶得到合理开发。从荷叶中筛选和评估具有优良生物活性的天然产物功能因子可拓宽荷叶资源应用范围、提高荷叶的经济应用价值。本文拟从荷叶中多酚类物质的提取、粗多酚纯化、多酚组分鉴定及抗氧化活性研究这四个方面出发,以期为荷叶资源的深度开发提供参考。主要试验结果如下：(1)对荷叶中多酚类物质进行提取,在单因素试验基础上,进行响应面优化设计。经软件模拟预测,得到响应面优化最佳条件：乙醇浓度53%,浸提时间103min,浸提温度65℃,验证实验得出荷叶多酚提取率即没食子酸当量(GAE:gallic acid equivalent)达到52.43mg GAE/g荷叶干粉,与理论值符合良好。(2)应用AB-8大孔树脂对荷叶粗多酚进行纯化,结合静态、动态试验,确定了荷叶多酚的纯化条件为：上样浓度1.48mg/mL,上样速率2BV/h,样液pH5.0；洗脱条件为70%乙醇溶液,洗脱流速1BV/h,按此条件,荷叶多酚纯度可由29.18%提高到53.17%。(3)运用不同浓度乙醇溶液梯度洗脱荷叶多酚,并对洗脱多酚做HPLC-DAD分析。结果显示,级分LP-30占树脂吸附多酚总量的59.63%,级分LP-50占树脂吸附多酚总量的21.20%,级分LP-70占树脂吸附多酚总量的4.87%。HPLC-DAD试验结果表明,选定的色谱条件对LP-30和LP-50中活性组分分离较好,级分LP-30有3个主峰,LP-50有7个主峰,并且各组分紫外吸收峰均具有黄酮类化合物紫外特征。(4)将级分LP-30和LP-50做HPLC-ESI-MS分析,发现级分LP-30中含有槲皮素-3-O-阿拉伯糖-半乳糖苷、芦丁和一待确认组分三种物质；级分LP-50中含有异槲皮苷、紫云英苷、香叶草素-7-0-己糖、异鼠李素-3-O-阿拉伯糖-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-鼠李糖-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷和锦葵色素-3-(=)-葡萄糖苷。其中,最后一种物质为首次在荷叶中发现。(5)测试了不同浓度荷叶多酚样品的抗氧化活性,总还原力测定结果表明,总还原力大小与样品浓度有明显的浓度依赖效应,四组样品总还原力大小有以下顺序：LP-P>LP-30>LP-50>LP-C;在Fenton体系中,荷叶多酚清除羟自由基整体效果较好,级分LP-30的IC50为0.059mg/mL比LP-50 (0.083mg/mL)略低；在清除亚硝酸盐实验中,各组样品均表现出较高的清除率,浓度达到0.200mg/mL时,各组样品的清除率均可达到97.00%以上；在清除H202的实验中,荷叶多酚的清除能力有限,样品浓度达到0.200mg/mL时,LP-P和LP-C的清除率也仅有38.09%和32.63%,约为Vc(73.99%)的一半。(6)运用Gaussian 03软件对三种选定分子做量子化学计算,结果表明,槲皮素分子内氢键数目最多,B、C环共面性较好,异槲皮苷和异鼠李素-3-O-葡萄糖苷由于3位糖苷的引入导致B、C环分别有不同程度的扭转,不利于电子离域的发生,影响了其抗氧化活性；比较三种分子酚羟基活性H原子的正电荷大小顺序：槲皮素H18>异槲皮苷H20>异鼠李素-3-O-葡萄糖苷H18,与相关文献对三种物质抗氧化活性大小排序一致；由最高占据分子轨道能量EHOMO和前线轨道能隙Egap大小推测三种物质反应活性大小顺序与酚羟基H原子电荷分布分析结论一致。