目的:通过长期高脂饮食辅以腹腔注射小剂量链脲佐菌素,诱导建立小鼠2型糖尿病模型,使用三种香豆素类化合物进行干预,探究香豆素类化合物的抗糖尿病作用及可能机制。方法:ICR小鼠高脂饮食6周后,连续腹腔注射30 mg/kg STZ 5天,3天后检测小鼠空腹血糖,将空腹血糖≧11.1 mmol/L视为造模成功,将其分为模型组、蛇床子素组、秦皮甲素组、秦皮素组和二甲双胍阳性对照组,分别给予对应药物5周,正常组进行普通饮食6周后,注射生理盐水5天,并给予药物溶剂的对照处理。从药效学角度考察:(1)小鼠空腹体重、空腹血糖、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数以及糖耐量的变化;(2)小鼠血脂变化;(3)胰腺及肝脏的GPx、CAT和SOD水平;(4)HE染色,观察肌肉、肝脏、脂肪、胰腺和肾脏组织病理变化,评价香豆素类化合物对2型糖尿病的干预效果。从分子水平考察作用机制:(1)利用Western Blot考察骨骼肌组织中GLUT4、Akt、p-Akt(Ser473)、TBC1D1、p-TBC1D1(Ser237)和AMPK、p-AMPK(Thr172)等蛋白表达;(2)利用Western Blot分析脂肪组织中GLUT4和AMPK、p-AMPK(Thr172)表达水平,探究香豆素类化合物对2型糖尿病的干预机制。结果:1、香豆素类化合物的药效学考察:(1)蛇床子素、秦皮甲素和二甲双胍显著降低2型糖尿病小鼠空腹血糖和HOMA-IR指数,并提高胰岛素水平,改善小鼠糖耐量,而秦皮素仅提高了胰岛素水平,这三种香豆素类化合物并未显著减轻患病小鼠体重;(2)蛇床子素显著降低了糖尿病小鼠的T-CHO、TG和NEFA水平,秦皮甲素显著降低了T-CHO和NEFA水平,而秦皮素仅对NEFA有显著降低作用;(3)蛇床子素和秦皮甲素对胰腺表现出抗氧化作用,显著提高了GPx、CAT和SOD活性,而秦皮素仅提高了胰腺CAT活性;三种香豆素类化合物均可显著提高肝脏GPx、CAT和SOD活性;(4)HE染色观察:与正常组比较,模型组小鼠骨骼肌肌纤维排列紊乱,核内移,排列不整齐,有一定程度萎缩,肝实质细胞由于脂肪积聚而空泡化,肝细胞排列紊乱,肝窦界限不清,脂肪细胞周边和胰岛出现炎症细胞浸润的现象。肾小球肥大,系膜和基底膜增厚,上皮细胞排列紊乱。蛇床子素能明显改善骨骼肌肌纤维排列紊乱和萎缩的现象,秦皮甲素和秦皮素作用不明显,这三种化合物改善了肝脏组织结构紊乱,降低脂肪在肝细胞积聚,其中蛇床子素作用最为明显。蛇床子素组的脂肪组织未见炎症细胞浸润,但秦皮甲素和秦皮素组改变不明显。给药组胰岛萎缩和炎症浸润现象明显改善;肾小球结构完整,未见明显的系膜和基底膜增生,且上皮细胞排列整齐。2、香豆素类化合可以显著促进Akt和AMPK表达及磷酸化,促进TBC1D1磷酸化和GLUT4转位。蛇床子素可以上调骨骼肌中AMPK蛋白磷酸化,在脂肪组织中也具有这样的效果,并激活下游蛋白TBC1D1,或通过促进Akt磷酸化,使得浆GLUT4向细胞膜转位。秦皮甲素促进骨骼肌细胞AMPK及其底物TBC1D1和Akt磷酸化的效果优于蛇床子素,但在脂肪组织中,对AMPK磷酸化没有显著影响。秦皮素在骨骼肌中促进GLUT4的表达和转位,但未见显著上调磷酸化AMPK和磷酸化TBC1D1。结论:香豆素类化合物对小鼠2型糖尿具有一定干预作用,对2型糖尿病相关的生化指标和组织病理具有一定的改善作用,其机制可能通过激活Akt或AMPK,磷酸化下游底物,促进GLUT4转位和葡萄糖转运。这三种化合物,以蛇床子素和秦皮甲素效果较理想,秦皮素次之。