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学习记忆是大脑最重要的高级神经功能之一,是衡量人类智力发育的重要指标之一。生活环境是人类生存的外部世界,对人的身心健康有重要影响,因此研究生活环境与学习记忆的相关性有重要意义,生活环境对中枢神经系统功能障碍及神经退化有重要影响,而其具体机制尚不清楚。本研究探讨了丰富和贫瘠环境对老龄雌性昆明小鼠(Mus musculus Km)空间学习记忆和情绪学习记忆的影响及其内在机制。
将13月龄老龄雌性昆明小鼠分为3组:正常对照组(normal control,CON),丰富环境组(enriched environment,EE),贫瘠环境组(impoverished environment,IE)。从环境处理第1周开始,每周一上午于喂食前称量小鼠体重,连续称量7周:第7周时,采用Morris水迷宫和电跳台方法分别测试小鼠的空间和情绪学习记忆能力,进行记忆能力测试后,我们在每组中随机取5只小鼠,分离其皮层和海马,用于测定其颞叶皮层及海马匀浆中的SOD活性和MDA含量,以此来研究丰富和贫瘠环境处理对小鼠行为学改变及与机体内氧化应激水平变化之间的关系;另在每组中随机取4只小鼠,分离其海马组织,采用免疫印迹法来测定海马组织匀浆中tau蛋白的磷酸化水平,剩余的小鼠,取其脑组织固定,做石蜡切片,用TUNEL法检测凋亡神经元,以探讨环境对tau蛋白磷酸化水平、凋亡神经元的影响及与学习记忆的相关性。
研究结果发现:(1)与CON组相比,EE组小鼠表现活跃、积极好动、行动敏捷,且有群体互动作用,每次更换玩具时,对新异刺激物充满了兴趣;IE组小鼠活动减少、情绪烦躁不安。(2)在Morris水迷宫测试中,前3天3组之间没有明显差异,在后3天,与CON组相比,IE组的潜伏期明显延长,EE组的潜伏期没有差异.电跳台测试中,研究显示,在第1天的学习训练中,与CON组相比,EE组的错误次数明显减少,IE组的错误次数明显增加,与CON组相比,EE组的跳上潜伏期明显缩短,而IE组的跳上潜伏期明显延长;在记忆测试中,在第2天时,与CON组相比,EE组的错误次数明显减少,IE组的错误次数增加;与CON组相比,EE组的跳下潜伏期明显延长,IE组的跳下潜伏期较短,在后2天,3组小鼠的错误次数均较少,跳下潜伏期均较长,组间无显著性差异。(3)取10%颞皮层及海马组织匀浆测得SOD活性和MDA含量,在海马部位,与CON组相比,EE组的SOD活性有所升高,但无统计学意义,IE组的SOD活性明显下降,与EE组相比,IE组的SOD活性明显下降,在皮质处得到了相同的趋势。(4)在海马组织测得的tau蛋白磷酸化水平,3组小鼠在海马处的总tau蛋白含量和Ser198/199/202位点非磷酸化的tau无明显差异,对于磷酸化的tau蛋白检测来说,与CON组相比,EE组海马tau蛋白pS396抗体显色减弱,IE组海马tau蛋白pS396抗体显色增强,plT31抗体显色也得到了相一致的趋势。(5)采用TUNEL法检测海马DG区的凋亡神经元,与CON组相比,IE组有较多数量的阳性细胞着色,EE组仅有少量阳性细胞着色。
上述结果表明,丰富和贫瘠环境对小鼠的空间及情绪性学习记忆能力可发生显著影响,其机制可能与机体的氧化应激水平、神经细胞内tau蛋白的磷酸化程度及神经元凋亡有关。