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本文研究目的:观察非小细胞肺癌患者外周血中肿瘤转移相关因子的表达情况;从分子水平上进一步认识气虚血瘀证在临床中的意义;为判断非小细胞肺癌气虚血瘀证患者的病情及预后提供客观依据。
研究方法:
1.观察对象:
共观察80例Ⅱ B~Ⅲ期非小细胞肺癌病例,其中40例为气虚血瘀证患者,男19例,女21例,平均年龄62.75岁;另40例为非气虚血瘀证患者,男26例,女14例,平均年龄61.18岁。病例来源于2005年4月至2006年3月北京中医医院肿瘤科门诊及住院病人,2006年1月至2006年3月东直门医院肿瘤血液科门诊及住院病人。
2.实验方法:
2.1标本采集:
全部受试者均于空腹采肘静脉血,每次采10ml,2ml置于含10%EDTA二钠45 μ l和60 μl抑肽酶的试管中,混匀;另8m1分别置于无抗凝剂的两试管中,每管4ml。采血后60分钟内将样本送至中心实验室化验。将抗凝血严格按CD44试剂盒说明书处理后,立即上流式细胞仪检测。将非抗凝血室温放置30~60分钟后,以2000rpm转速离心15分钟,于超净台中取血清,分别放入1ml Eppendof管中,-20℃保存待测。
2.2标本测定:
采用酶联免疫法(ELISA)检测人外周血血清VEGF、Endostatin、slCAM-1三种物质含量。采用流式细胞仪技术检测人外周血CD44含量。
研究结果:
气虚血瘀证组患者的外周血CD44、血清VEGF、Endostatin、slCAM-1表达均高于非气虚血瘀证组患者:证型因素对这四项指标的影响都具有统计学意义,是这四项指标最主要影响因素;性别对CD44和VEGF表达的影响作用具有统计学意义,但作用小于证型因素。
研究结论:非小细胞肺癌气虚血瘀证与肿瘤转移相关因子存在客观的内在联系;外周血CD44、血清VEGF、Endostatin、sICAM-1四项指标的检测可作为气虚血瘀证的微观辨证依据;由于气虚血瘀证组患者的外周血CD44、血清VEGF、Endostatin、slCAM-1表达均高于非气虚血瘀证组患者,而这四项指标与肺癌的转移与预后密切相关,VEGF的表达可视为肺癌的独立预后因素,因此本研究提示非小细胞肺癌气虚血瘀证患者较非气虚血瘀证患者可能存在更大的转移风险。