背景：随着临床上出血性疾病和血栓性疾病患者的增多,凝血酶原时间(PT)-国际标准化比值(INR)、部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原定量(FIB)测定,简称凝血三项,是诊断出、凝血性疾病的基本检测项目,是凝血系统检查的必做项目,需要实验室提供准确的数据。PT、APTT测定是外源性及内源性凝血系统的过筛试验,特别对血液病、DIC、脑出血、肝病、急慢性感染、脑梗死、心肌梗死等病例的试验很有临床意义；又是外科手术全筛查的主要项目检查之一；另外还是口服抗凝药物治疗监测的首选指标。由于检验设备日异更新,血凝分析仪已普及各大、中、小型医院,一个实验室有两台或以上的大小型血凝仪,这就要求检测结果的准确性和一致性能够达到统一。但凝血系统的实验室检查是种多因素分析,各项指标与凝血因子浓度间没有线性关系,不同的方法、试剂及检测仪器都可能导致测量结果的差异。因此,对其室内、室间检测结果的可比性带来不少困难。目的：现有两台血凝仪,一台是STAGO公司生产的START-4通道半自动血凝仪,检测方法为凝固(磁珠)法；另一台是SYSMEX公司生产的CA7000全自动血凝仪,采用光学(散射光比浊法)检测。将这两台不同检测系统(不同的型号、不同的检测原理,不同的试剂)的仪器进行比对、评估,以了解两检测系统测定PT、INR、APTT、FIB测定是否有差异,差异是否有统计学意义,怎样有利于临床判读。两种仪器结果的评估对今后医院开展凝血常规检测工作具有非常重要的意义,也能为使用同类仪器的其他实验室提供参考数据。经过比对,有效提高了科内不同凝血分析仪器间的可比性,能够及时发现偶然误差和仪器的系统误差,促进工作人员及时解决存在的各种问题。尽可能减少由于在不同型号仪器上所测定结果差异较大而诱发的不必要的医疗纠纷,有效地保证检验结果的准确性和精密度,提高检验的质量。方法：1.仪器精密度检测。参考美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件,先作一个初步的批内精密度测定,选取一份40例正常人混合血浆各自在两台仪器上连续检测20次,计算PT、APTT和FIB的SD与CV评价批内精密度。再把一份正常人混合血浆分装20管,连续20天每天检测两次,计算PT、APTT和FIB的SD与CV评价批间精密度。从而反映两仪器的重复性如何。2.仪器准确度检测。用DADE中值的、高值的质控品在CA7000仪器上各连续测定20次,计算出均值,标准差和变异系数及偏差系数。同样,STAGO配套的中值和高值质控品在START-4仪器上各连续测定20次。验证两种检测系统的准确度。3.比对试验。每天选取临床不同范围(正常值和异常值)的凝血常规标本,同时在两台仪器上进行检测,共记录20份中值的PT、APTT和FIB的结果和20份高值的结果。以CA-7000作为参比仪器,其在比对过程中所测的值为靶值,START-4为测试仪器其所测的值作为测定值,作方法学相关性比较,计算相关系数r值和斜率a值。利用配对t检验,计算每组的t值和P值。4.抗干扰试验。根据NCCLS文件的要求,采取在体外添加干扰物于正常血浆中的方法制备待测标本。应用配对t检验。收集新鲜混合血浆,一份标本一分为二,一份加入疑似干扰物作为测定标本(T),另一份加同样体积的蒸馏水作为对照标本(C),同时在两台仪器上进行检测。干扰值在对照组±1.96 SD(95%可信限)范围内为无显著干扰,超出范围的表示此浓度开始对临床标本的检测有干扰。结果：1.通过批内精密度测定,两种检测系统测定PT(INR)、APTT结果的CV值均<5%,FIB的CV<6.6%,变异系数均在允许的范围内,重复性好。CA7000测定PT、INR、APTT、FIB的批内CV分别为2.2%,1.9%,2.9%,4.4%；START-4测定的批内CV分别为3.1%,4.1%,3.5%,6.3%。CA7000测定PT、INR、APTT、FIB的批间CV分别为3.8%,2.5%,4.3%,5.9%；START-4测定的批间CV分别为4.0%,3.4%,4.6%,6.8%。全自动血凝仪CA7000比半自动血凝仪START-4测定的CV小。批内的比批间的CV值小。2.用CA7000仪器及配套试剂检测DAEA中值和高值质控品的准确度,CV值<5%和6.6%,偏差系数均<5%,符合率达95%。START-4仪器及配套试剂检测STAGO中值和高值质控品的准确度,除FIB以外的测定值的CV值均<5%,偏差系数也<5%。3.通过CA7000与START-4系统正常值范围和异常值的病人标本测定结果的比对,两种检测系统的测定值p<0.05在统计学上有显著性差异。以CA 7000系统为参考方法与START-4系统进行方法学相关性比较,发现这两种方法学比较的r值>0.9,说明相关性好。4.对两种仪器进行干扰试验,结果是START-4抗干扰能力强,对高血脂、溶血和高胆红素的标本进行测定,结果均在±1.96SD的范围内,表示无干扰。CA7000抗干扰能力一般,其测定结果表明当溶血标本游离血红蛋白浓度达到20g／L时,CA7000测定的PT、APTT明显延长,FIB减低,三个项目的干扰值都超出了±1.96SD的范围,说明此三项检测同时受干扰。在CA7000上测定时,当甘油三酯浓度为21.6mmol／L、36mmol／L、43.2mmol／L时,FIB、PT、APTT测定结果依次开始受干扰,检测结果大于120秒,干扰值也超出±1.96SD的范围。FIB测定抗干扰能力最差,APTT最好。当总胆红素在353μmol／L以内,仪器都不受干扰,表明仪器抗胆红素干扰能力强。结论：目前,血凝仪随血栓和止血试验检测的大力推广,性能日趋稳定。START-4通道半自动血凝仪和CA7000全自动血凝仪检测系统的重复性和准确性都好,测定的精密度、准确度都达到了临床的要求。全自动血凝仪的精密度比半自动血凝仪的要更好。在操作时,半自动仪器较为繁琐,容易受操作者熟练程度的影响,可能有检测不出结果或明显的错误结果,需要再重新测定,受人为因素影响,而全自动血凝仪基本排除了人为因素的影响,而且可同时检测几个项目,速度快。通过比对实验,可以清楚地看到,不同的系统间存在一定的差异,对结果产生影响。统计学分析说明两个系统对PT (INR)、FIB、APTT的检测结果有显著性差异。可能与两公司生产配套试剂不同,灵敏度有一定的差异有关。方法学不同,检测结果也会有差异。我们认为对于凝血常规同一项目不同检测系统的对测定结果有很大的影响,同一实验室最好用同一检测系统。如实验室内有不同的检测系统存在,应定期用正常人混合血浆作比对试验,并每天和病人标本一样做室内质控。由于两个系统对PT (INR)、FIB、APTT的检测结果有显著性差异,我们要给不同的检测系统建立不同的参考范围,在自己的参考范围内进行临床判读。针对本科室的两台血凝仪,Sysmex CA7000是全自动的血凝仪,操作方便,重复性好,速度快,日常工作可以以此为主；但对脂血、溶血、黄疸的抗干扰性不如STAGO-START-4通道半自动血凝仪,遇到此类本底过高的标本可用START-4通道半自动血凝仪检测,使两台仪器的检测系统取长补短,在自己的参考范围内出结果。