目的：探究NTHi-DNA诱导产生的IFN-Ⅰ在宿主抗NTHi感染效应中的作用，并对其调控机制进行初步研究。
　　背景：不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）是一种定植于大多数健康成人上呼吸道的革兰氏阴性球杆菌。当机体免疫力降低时，NTHi可扩散到至下呼吸道引起肺部炎症或者已有疾病的加重，如慢性阻塞性肺病（COPD），研究NTHi与宿主相互作用的机制研究可为制定防治NTHi感染策略提供新思路和新方法。我们前期实验发现NTHi-DNA可以诱导宿主巨噬细胞和上皮细胞Ⅰ型干扰素(IFN-Ⅰ)的产生。IFN-Ⅰ在抗病毒免疫中是必不可少的，但在不同细菌引起的感染中其作用却不完全相同的。伤寒沙门氏菌、结核分枝杆菌、肺炎链球菌等多个细菌感染模型中已证实，IFN-Ⅰ在宿主防御细菌感染中发挥的作用因细菌种属的不同而不同，并且与炎性因子的调节有关。但在NTHi感染COPD及肺炎模型中，IFN-Ⅰ在宿主和病原体之间相互作用中所扮演的角色尚未被完全阐释清楚。因此，我们提出NTHi-DNA 诱导产生的IFN-Ⅰ是否通过调节某些炎性因子的表达，改变宿主对 NTHi 的易感性，进而影响抗NTHi细菌的感染效应。
　　研究方法：
　　1．体外实验以NTHi-DNA或外源性IFN-β预处理原代腹腔巨噬细胞（PEMs）后，感染NTHi，检测PEMs对NTHi的吞噬杀伤，初步探究NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ对宿主细胞抗NTHi感染效应的影响；进一步分离IFNAR缺陷（IFNAR-/-）PEMs验证IFN-Ⅰ信号通路对宿主细胞吞噬杀伤NTHi的影响；
　　2．在建立模拟COPD小鼠模型基础上，气道滴注NTHi-DNA或外源性IFN-β，经呼吸道感染NTHi，监测小鼠体重和生存率，H&E染色观察小鼠肺损伤情况，验证NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ对小鼠抗感染的转归；使用 IFNAR-/-小鼠证实 IFN-Ⅰ 信号传导在小鼠抗 NTHi 感染中的作用。
　　3．以q-PCR、ELISA检测NTHi-DNA或IFN-β预处理后受NTHi感染的PEMs炎性因子IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和趋化因子 CXCL10的诱导表达情况，并利用IFNAR-/-PEMs明确IFN-Ⅰ信号的作用；在模拟COPD小鼠和IFNAR-/-小鼠感染肺组织中验证炎性因子表达情况是否与体外实验结果一致。
　　4. 通过检测NTHi-DNA或IFN-β预处理后受NTHi感染的PEMs中的P38 MAPK激活以初步证明NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ对炎性因子的调控，并使用P38 MAPK信号通路抑制剂进一步证实P38 MAPK信号分子在NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ调节炎性因子表达中的作用。
　　研究结果：
　　1、NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ减弱了PEMs对NTHi的吞噬杀伤能力，并加重了NTHi感染的模拟COPD小鼠肺部炎症反应，不利于NTHi感染小鼠存活。与IFNAR野生PEMs相比，IFNAR-/- PEMs对NTHi的吞噬杀伤增强；IFNAR-/-小鼠肺部炎症反应较弱，组织损伤减轻，显示出更强的抗NTHi感染能力。
　　2、NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ能上调NTHi感染PEMs的和感染小鼠的肺部炎性因子IL-1β、IL-6、IL-12和趋化因子 CXCL10的表达，而IFNAR缺陷可导致这些炎性和趋化因子表达下降。
　　3、NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ上调PEMs炎性趋化因子IL-1β、IL-6、IL-12、CXCL10的产生与信号分子P38 MAPK的激活有关。
　　结论：
　　本研究证实，NTHi-DNA诱导的IFN-Ⅰ减弱了PEMs对NTHi的吞噬杀伤能力，并加重了NTHi感染的模拟COPD小鼠肺部炎症损伤，增加了宿主对NTHi的易感性。这种对宿主有害的炎性应答与IFNAR识别IFN-Ⅰ后激活p38 MAPK，从而上调炎性趋化因子IL-1β、IL-6、IL-12、CXCL10有关。我们认为NTHi-DNA引起的IFN-Ⅰ应答可能被细菌利用为其抵抗宿主免疫清除的策略，对宿主（尤其是COPD患者）感染NTHi的预后转归不利。本研究有助于完善我们对NTHi与宿主免疫细胞相互作用的认识，为COPD患者寻找抗NTHi感染及耐药的治疗策略提供新的理论基础。