流行性腮腺炎(mumps)是全球性流行的传染病，终年有发病，人对流行性腮腺炎易感性为88％-100％，15岁以下儿童占发病总数85％-95％，临床上主要表现为腮腺的非化脓性肿胀，疼痛伴发热，并发症多为睾丸炎，无菌性脑膜脑炎等。 自从使用腮腺炎疫苗后，腮腺炎病例的报道虽显著减少，但国内外每年均有流行性腮腺炎的流行发生。人们必须面对这样一个问题：接种疫苗后免疫保护性是否持续终生?近期流行的野毒株是否与现行疫苗株的核苷酸序列存在差异?这些差异是否会影响到疫苗的保护性? 奉化地区2001年腮腺炎发病率明显高于往年，发病以儿童为主，呈集体发病，危害青少年健康。此次发生腮腺炎爆发流行，涉及人数多达600余人，患者均在14—18月龄接种过麻疹--腮腺炎—风疹三联疫苗。本文一方面采用ELISA试剂盒检测患者组和正常组抗腮腺炎IgG和．IgM抗体；另一方面比较患者血清中分离得到的野毒株与疫苗株的核苷酸序列，分析腮腺炎病毒的分子流行病学，从两方面对接种腮腺炎疫苗后再感染的现象进行探讨。 第一部分：临床血清标本和正常对照组抗腮腺炎IgG和．IgM抗体水 浙江大学U＊。学位论义 平的研究 为了了解临床血清标本抗体水平和正常对照组抗体水平有无差异， 探讨接种腮腺炎疫苗后发生再感染的免疫学特点，，我们采用购自艾夫朗 公司的 HOPE LABORATORIES MICROWELL ELISA lgG牙 ELISA lgM试剂盒分别检测血清中抗腮腺炎 lgG和．lgM抗体．肾民 ELISA抗七检狈结果表明，＊ 床血消标本中lgG可性率为96·7％．ISM 阳性率为 84．8地其中 lgG强阳性而Ig卜1阴性者共 14b血请标对；IgG阴 性而IgM阳性者共3份血清标本；其余血清标本均为IgG．lgM阳性；正常 寸照组IgG卜性率为92o，IgM厂性率为40； 因此我们认为，本实验临床标本采自发病6天内，若为初次感染则 血清学应以lgM抗体为主，但血清学检测结果可见：接种过腮腺炎疫 苗后发生再感染患者中 IgG阳性率叨显高于IgM阳性率，证实此次感 染为再次应答：其中1吵阳性而1咖阴性者表明再度感染的回忆反应； lgG阴性lgM阳性代表新感染，接种疫茁后产生的抗体随着时间扯移巳 减弱消失，迢到腮腺炎野毒株重新感染产生lgM抗体；接种疫茁后J‘”‘ 生的lgG抗体仍旧存在，遇到腮腺炎病毒后发生新感染，出现IgG．Ighl 均为阳性的现象． 正常组的儿童均在14一18月龄接种麻疹一腮腺炎一风疹三联疫仇 据报道，接种疫苗后所产生的抗体可持续 门 年之久月前儿章平均年龄 为8岁，IgG仍保持较高水平与报道相符合；．汀常组扣人中有两份血清 呈现IgM强阳性，但患者并无临床症状，可见腮腺炎隐性感染的存在；i 综上所述，接种过腮腺炎疫苗而发生再感染的患儿lgG阳性率与同 龄接种过腮腺炎疫苗但未发生再感染的体检儿章IgG阳性率相比，两者 无显著差异，山于接种疫苗后保护性抗体衰减引起免疫失败的可能性不 大。第二部分：临床血清标本中扩增得到的野毒株与疫苗株特定片断序 2 浙江大学硕土学位论文 列比较 为了从分子生物学方面探讨发生再感染的原因，我们收集 200年 3 月－－月春季宁波奉化地区接种过疫苗后再发腮腺炎的患儿发病6天内 血清标本100份，其中男性70例，女性30例严均年龄7岁．所有患者均为 住院患儿，根据流行病学资料，临床表现和实验室检查，确诊为流行性 腮腺炎，排赊了麻疹和风疹感染。所有思儿均在14一旧月龄接种过麻疹 一腮腺炎一风疹三联疫苗佣性对照用麻疹－腮腺炎一风疹三联疫苗（购 自浙江省防疫站，批号为B4200）．采用TRIZOL试剂抽提病毒总RNA 后，通过RT巢式PCR扩增特定片断，亘接测序反应后进行序列比较． 结果显示：采用RT巢式PCR方法，经过相对分于质量大小鉴定后， 患者阳性血清标本及阳性对照均得到413hp的SH基因及旁侧区CDNA 预期扩增产物。临床血清标本中所测序列全长378个核昔酸，图中序列 全长378个核昔酸，其中l－41（全序列中位置6169－七20）为F基因的 3’非编码区，42－49为 F——SH’dJ隔区（62if一6218），50——98为 SH基 因片段的 5’非编码区（62一6267），99——272为 SH基因片段的编码