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目的:引导骨组织再生膜(Guided Bone Regeneration，GBR)目前广泛应用于种植体周围的骨缺损修复、牙周病的治疗及其它骨折、骨缺损修复，通过其物理屏障功能将病损区与周围组织隔离，创造一个有利于组织愈合、相对封闭的组织环境，避免软组织的长入且保护新形成的骨组织。在种植体修复治疗中，往往由于种植体颈部菌斑堆积等引发种植体周围炎，而目前临床常用的GBR膜无抗菌活性，限制了其临床应用。因此，本研究采用静电纺丝技术制备具有抗菌、成骨双效活性的胶原/壳聚糖GBR膜，在隔离、引导成骨的同时具有长效抗菌性能。 方法:一、抗菌/成骨双效GBR膜的制备和表征 通过静电纺丝技术制备明胶/壳聚糖纳米纤维膜及明胶/壳聚糖/纳米羟基磷灰石(Nano Hydroxyapatite，nHA)纳米纤维膜，利用静电喷雾技术制备PLGA载药微球载入抗菌成分—抗菌肽PAC-525，运用层层电纺技术将二者复合，得到具有抗菌、成骨双效活性的引导骨组织再生膜，对其进行扫描电子显微镜(SEM)观察形貌并测量其纤维直径(Fiber diameter)、测定其机械力学性能(Mechanical test)、水接触角(WCA)以表征理化性能。使用IBM SPSS Statistics20统计软件进行统计学分析。 二、生物相容性及成骨性能 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(r-BMSC)接种于材料上1、4、7天，利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒测其OD值以评价材料细胞毒性，并进行扫描电子显微镜(SEM)、激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocalmicroscopy，LSCM)观察，观察细胞于材料上形貌特征及其增殖情况，同时对种植于材料表面的r-BMSC诱导14天，测其碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性以评价其成骨活性。 三、体外抗菌实验 将材料剪裁成1cm*1cm标准尺寸置于磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffersaline,PBS)中37℃、60rpm摇浴31天，定期半量取出上清液测其浓度以绘制其释放曲线，并取其第一周、第四周释放上清液测其抑菌环大小和抑菌率值以评价其对微生物的杀灭效果。 结果:一、抗菌/成骨双效GBR膜的制备和表征 扫描电子显微镜观察显示通过静电纺丝技术和静电喷雾技术相结合的方法可制备出形貌优良的纳米纤维双层膜结构，利用SEM图测量其纤维直径，显示无nHA组纤维直径范围为35.71-928.57nm(358.93±173.81nm)，加入nHA组纤维直径范围为106.19-1008.85nm(408.67±196.57nm)，nHA的加入显著增加了纤维直径（P＜0.05，两者有统计学差异），对其进行机械力学测量示无nHA组未交联时其模量为3.15±0.57MPa，交联后模量为5.11±0.96MPa，加入nHA组未交联时其模量为4.97±2.43MPa，交联后模量为7.22±1.49MPa，nHA的加入使其模量显著提高（P＜0.05，两者有统计学差异），交联剂的引入使其模量进一步提高（P＜0.05，两者有统计学差异）。水接触角测试结果显示无nHA组WCA为73.17±1.22°，加入nHA组WCA为69.53±0.31°，nHA的加入使其接触角显著降低（P＜0.05，两者有统计学差异），显示了更好的亲水性。 二、生物相容性及成骨性能 CCK-8、SEM、LSCM结果显示r-BMSC能在材料上生长良好，材料无细胞毒性，能促进细胞生长，ALP活性检测显示nHA的加入使材料具有优良的骨引导性能。 三、体外抗菌实验 抗菌肽在材料中早期有一个快速释放过程，其后经历缓慢释放，在体外释放可达31天以上，且具有良好的缓释效果，早期（1周）有明显抑菌环，对大肠杆菌抑菌环直径为94.61％，对金黄色葡萄球菌抑菌环直径为95.08％，对细菌具有明显杀灭作用，后期（4周）有一定抑菌环，对大肠杆菌抑菌环直径为68.26％，对金黄色葡萄球菌抑菌环直径为77.36％，对细菌增殖具有显著抑制作用。 结论:1.通过静电纺丝技术和静电喷雾技术相结合的方法可制备出形貌优良的纳米纤维膜结构。 2.nHA的加入可明显改变材料的形貌、纤维直径、机械力学性能、水接触角等理化性质。 3.nHA的加入可明显改变细胞行为，并更利于细胞粘附、增殖、成骨分化。 4.抗菌微球的引入使其具有抗菌性能，并具有良好的缓释效果，在早期对细菌具有明显杀灭作用，后期对细菌增殖具有显著抑制作用。