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一、抗结肠癌活性药物Largazole的LC/MS/MS分析方法及药动学研究Largazole是由佛罗里达大学Dr. Luesch实验室从佛罗里达的海洋蓝藻Smploca sp.中提取分离得到的具有组蛋白去乙酰化酶(HDACs)抑制剂作用的十六元环肽内酯化合物。研究发现作为前药的Largazole可以在血浆中迅速水解释放Largazole的硫醇(Largazole Thiol),Largazole Thiol可以螯合组蛋白脱乙酰酶的活性部位的锌离子,从而发挥组蛋白去乙酰化酶的抑制作用。Largazole对结肠癌细胞模型和小鼠的结肠肿瘤模型有很好的治疗效果。本文对Largazole在大鼠体内的药动学进行研究,初步阐述了Largazole的药动学模型及参数,为进一步开发研究抗肿瘤候选药物Largazole以及临床试验提供非常重要的参考和依据。本文主要的研究工作如下：一、Largazole Thiol在血浆样品中的定量分析方法研究建立的血浆样品中的Largazole Thiol的处理方法以及LC/MS/MS的定量分析方法,并且根据美国食品药物管理局的生物样品分析规范对该方法进行方法学验证。Largazole Thiol的血浆浓度在12.5ng/mL-400ng/mL的浓度范围内Largazole Thiol的吸收强度与浓度的线性关系良好,回归方程为y=0.003x+0.0076,R2=0.9997。血浆中的最低定量限为12.5ng/mL;低、中、高浓度的质量控制的血浆样品的日内精密度在2.56%-12.08%,日间精密度为7.12%-9.77%之间；样品回收率为77%-87%；其基质效应稳定在72%-75%；血浆样品的稳定性考察显示Largazole Thiol在室温放置超过4h、冻融1次、冻融2次、冻融3次的情况下稳定,结果显示着各项考察均满足美国食品药物管理局的生物样品分析规范的要求,表明该方法适用于Largazole Thiol在血浆样品中的含量测定。二、Largazole Thiol的血浆蛋白结合率的研究通过超滤法测定Largazole Thiol的大鼠血浆以及人血浆的蛋白结合率,结果显示Largazole Thiol的大鼠血浆蛋白结合率为77.14%,人血浆的蛋白结合率为90.13%三、Largazole在大鼠体内的药动学研究1、大鼠通过静脉给药Largazole后,血药浓度-时间曲线的数据采用非房室模型测定药动学参数,Largazole在大鼠体内的半衰期为0.5hr。2、用Phoenix和NONMEM软件对Largazole在大鼠体内的药动学模型进行分析比较,结果显示二房室模型能更好的拟合Largazole的药时曲线为最佳模型。并且该模型通过NONMEM进行方法验证,结果表明该模型的稳定性良好。二、左旋四氢巴马汀(L-THP)对嗜可卡因患者的临床药动学研究左旋四氢巴马汀是从中药延胡索提取分离得到的活性物质,已经作为镇痛药(颅痛定)在中国已经应用于临床实践长达40年。目前研究发现左旋四氢巴马汀(L-THP)具有很好抗药物成瘾作用,因为其独特的药理作用可能成为治疗可卡因成瘾的候选药物。本文对左旋四氢巴马汀在志愿者体内的临床药动学以及安全性进行了研究,为下一步的临床试验和优化用药方案提供数据。本文主要研究工作如下：一、左旋四氢巴马汀和可卡因在血浆样品中的定量分析方法研究建立的血浆样品中的左旋四氢巴马汀和可卡因的处理方法以及UPLC-FLD的定量分析方法,并且根据美国食品药物管理局的生物样品分析规范对该方法进行方法学验证。主要针对其专属性考察、标准曲线、最低定量限、日内精密度和准确度、日间精密度和准确度、样品回收率、稳定性方面进行验证,结果显示着各项考察均满足美国食品药物管理局的生物样品分析规范的要求,表明该方法适用于在血浆样品中左旋四氢巴马汀和可卡因的含量测定。二、左旋四氢巴马汀和可卡因的临床药动学研究志愿者通过临床给药方案给药后,血药浓度-时间曲线的数据采用非房室模型测定左旋四氢巴马汀和可卡因药动学参数。三、左旋四氢巴马汀的临床安全性研究比较给药组和安慰剂组的志愿者吸食可卡因后的血压及心跳,初步评价左旋四氢巴马汀的临床用药安全性。结果显示给药组相对安慰剂组的志愿者的血压及心跳没有显著性的提高据符合美国食品药物管理局的要求。