【摘 要】
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原发性肝癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,肿瘤的生物学行为的多样性和临床情况的复杂性导致相同分期分级患者在接受同样的根治性手术治疗后常出现不同的预后。因此对原发性肝癌患者手术治疗预后的评估在临床患者的治疗上显得意义非凡。本研究通过两个不同方向入手,对原发性肝癌患者接受根治性肝癌手术治疗的预后标记物进行研究。首先本研究从基因水平对原发性肝癌患者的预后进行研究。通过对BCLC分期0期和A期患者中,接受
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原发性肝癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,肿瘤的生物学行为的多样性和临床情况的复杂性导致相同分期分级患者在接受同样的根治性手术治疗后常出现不同的预后。因此对原发性肝癌患者手术治疗预后的评估在临床患者的治疗上显得意义非凡。本研究通过两个不同方向入手,对原发性肝癌患者接受根治性肝癌手术治疗的预后标记物进行研究。首先本研究从基因水平对原发性肝癌患者的预后进行研究。通过对BCLC分期0期和A期患者中,接受根治性肝癌切除手术术后半年内复发患者（n=11）,术后2年内无复发患者（n=10）,以及正常的肝组织（n=5）进行转录组测序（RNA-seq）,之后组间比较寻找到了16个差异基因,其中5个属于金属硫蛋白-1的亚型。针对其中差异最为明显的两个基因,MT-1H,MT-1M的功能进行进一步验证。MT-1H在原发性肝癌患者的癌组织中表达量较正常组织低,过表达MT-1H的肝癌细胞的增殖能力较普通肝癌细胞弱（p=0.02）,过表达MT1H的肝癌细胞在裸鼠体内成瘤率更低（p=0.040）,对99名原发性肝癌患者肝癌组织RT-PCR检测结果提示低表达的MT-1H的RNA的患者的肿瘤复发率更高,预后更差（p=0.023）。通过RT-PCR检测91名肝癌患者肝癌组织内MT-1M的RNA结果提示,低表达的MT-1M亦预示着患者相对较差的手术预后（p=0.029）。同时MT-1M的RNA表达量与患者的术前甲胎蛋白水平之间存在关联（p=0.017）。对于原发性肝癌手术治疗的预后标记物研究的另一个方向为循环肿瘤细胞。本研究中通过ASGPR,GPC3,CK作为核心的细胞表面标记,通过磁珠筛选的方式对因原发性肝癌接受肝移植治疗的患者（n=40）术前外周血内的循环肿瘤细胞进行检测.结果提示每7.5ml患者外周血内可检出的CTC数量为3个到43个之间,平均18.52±8.47个。但是单纯检测患者外周血循环肿瘤细胞预测患者术后肿瘤复发及手术预后不具备统计学意义。对其中的20名患者的术前术后循环肿瘤细胞数量变化进行检测后发现,CTC数量上升提示肿瘤复发率较高,手术预后不佳（p=0.006）。且循环肿瘤细胞数量变化与患者术前甲胎蛋白的水平直接存在关联（p=0.006）。本研究从基因水平和细胞水平两方面入手,对原发性肝癌患者接受手术治疗的预后标记物进行了研究。发现了MT-1H,MT-1M两个肝癌手术治疗预后的基因标记,发现了循环肿瘤细胞术前术后动态变化的细胞水平标记。通过上述标记物的补充能够使得患者的术前评估以及手术治疗预后的预测更加准确,从而为原发性肝癌临床的诊断治疗提供更加有力的支持。
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