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表皮对于昆虫是极其重要的结构，它能帮助抵御化学侵蚀，物理损伤及病原微生物感染。表皮主要是由几丁质和蛋白质组成，其中包裹着几丁质的蛋白具有几丁质结合活性。家蚕蜕皮液的蛋白质组学分析发现了六个独特的蛋白，它们都包含三个14家族的几丁质结合模块，因此被称为CPAP3(cuticleproteinanaloguetoperitrophinwith3chitinbindingdomains)，它们被推测是从被降解的旧表皮释放到蜕皮液中的。目前在赤拟谷盗中，CPAP3蛋白已经被证明在维持表皮结构的完整性中发挥重要作用。因此，针对家蚕CPAP3s蛋白与几丁质结合性质的研究，有助于在蛋白层面上理解CPAP3s在几丁质形成及表皮装配过程中如何发挥功能。 本论文的研究工作包括: (1)利用PCR技术调取家蚕的六个CPAP3s基因（BmCPAP3-A1，BmCPAP3-A2，BmCPAP3-B，BmCPAP3-C，BmCPAP3-D1和BmCPAP3-D2），它们的开放阅读框大小依次为714bp，684bp，873bp，789bp，645bp和621bp。氨基酸序列的N-端普遍存在信号肽，推测为分泌蛋白。BmCPAP3s的基因转录水平研究表明，在不同发育过程中，BmCPAP3-A1，BmCPAP3-A2，BmCPAP3-B和BmCPAP3-C在化蛹时表达量最高，而BmCPAP3-D1和BmCPAP3-D2分别在成虫前24h和化蛹后12h表达量最高。这些现象暗示了BmCPAP3基因可能在昆虫蜕皮过程中发挥作用。 (2)构建BmCPAP3s的表达载体，转入大肠杆菌BL21菌株中，再用IPTG诱导重组蛋白表达。结果在菌体破碎液的上清中检测到重组蛋白，利用金属螯合层析分离纯化得到目的蛋白。每升发酵液的蛋白产量分别为:BmCPAP3-A1，5.0mg;BmCPAP3-A2，7.5mg;BmCPAP3-B,1.2mg;BmCPAP3-C,5.5mg;BmCPAP3-D1,1.0mg;BmCPAP3-D2,1.3mg。 (3)对重组BmCPAP3s进行几丁质结合活性的研究。研究了它们对固体几丁质，胶体几丁质和部分去乙酰化几丁质（壳聚糖）的结合活性。结果证明六个BmCPAP3s蛋白都能与以上三种底物结合。但是，它们对固体几丁质表现出非常强的结合活性（结合量超过80％），对胶体几丁质结合能力稍弱（结合量约40％），对壳聚糖的结合能力最弱（绝大多数蛋白结合量低于30％），暗示了它们更倾向结合乙酰化的晶态几丁质。 (4)通过HPLC分析了BmCPAP3-C在缓冲液中的分子量约为53.4kD，是其理论分子量的2倍。构建了BmCPAP3-C的5个截短体蛋白并在大肠杆菌中表达，重组蛋白以包含体形式存在，未能分离纯化。本文的工作为研究家蚕CPAP3s蛋白在几丁质形成过程中如何发挥功能提供了基本的依据。