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酵母是一种理想的真核模式生物,为广泛用于工业生产的生物材料。细胞在其自然栖息环境中和工业培养过程中,常常要忍受高盐、高糖渗透胁迫。为了揭示盐胁迫对酵母的作用,本文以酿酒酵母2144为出发菌,氯化钠作为渗透调节剂。研究了盐胁迫对酵母细胞生长、形态结构和代谢的影响,希望对相关工业生产提供理论依据。1.酵母细胞经NaCl处理后,菌落生长明显受抑制,细胞的活细胞数和生长密度均显著降低;在0.3mol/L NaCl作用下,细胞到达稳定期的时间与对照基本一致;而在0.6mol/L和1.0mol/L NaCl作用下,细胞生长缓慢,对数期延长;随着NaCl浓度的依次升高,细胞收缩,菌落数依次递减;葡萄糖消耗速率减慢;发酵结束后pH值降低。2.分析了NaCl胁迫下酵母胞内蛋白质的变化规律。在各种浓度的NaCl胁迫下酵母细胞均出现了相对分子质量为53kDa的蛋白质,随着NaCl浓度的升高该蛋白延迟表达。在添加0.3mol/L NaCl和0.6mol/L NaCl胁迫下,培养到10h时均出现两条蛋白谱带其分子量依次为61kDa和65kDa。3.分析了酵母细胞对Na+的吸收特征。随着NaCl浓度的依次升高,胞内Na+呈升高趋势而K+的含量呈下降趋势;Na+/K+比升高且在胁迫条件下的Na+/K+明显高于对照组。4.研究并发现海藻糖、甘油与酵母耐NaCl机制有关。酵母菌株在NaCl胁迫下胞内海藻糖含量明显高于对照组。随着NaCl浓度的增加,胞内甘油含量有着明显的增加。在不同盐胁迫浓度下,酵母胞外甘油的含量均随着胁迫时间的延长,呈现出先上升后下降的变化趋势。5.经Sephadex G-25葡聚糖凝胶层析分离盐胁迫下酵母分泌蛋白可得出:当酵母细胞培养至8h时,无论是对照组还是胁迫组均在30管附近出现峰值管;胁迫组均在40管附近又出现峰值,而对照组则未出现。当酵母细胞培养至16h时,各组均在28管、42管附近出现峰值管;对照组和添加0.3mol/L NaCl的胁迫组均在11管出现峰值,而在添加0.6mol/L NaCl和1.0mol/L NaCl的胁迫组未出现;添加0.3mol/LNaCl的胁迫组在57管出现峰值管而对照组和其它两个浓度的胁迫组均未出现。