由于原油的储存和运输、石油冶炼、泄漏事故、含油污水灌溉等原因,石油类物质已经成为环境中的主要污染物之一。但应用ARDRA技术对石油烃污染土壤微生物多样性的影响一直以来没有一个全面和系统的认识。本论文首次采用传统微生物培养方法与PCR/ARDRA现代分子生态学研究方法相结合的手段系统评价了长期石油污水灌溉对中国最大的石油类污水灌区—沈抚灌区的土壤微生物细菌群落组成、多样性的影响。结果表明,总石油烃(Total petroleum hydrocarbon/TPH)和总多环芳烃(Total Polycyclic Aromatic Hydrocarbons/PAHs)在灌区干渠中游的积累和分布趋势大体上是上游地区较严重,下游地区较轻,并且TPH与PAHs含量呈显著正相关。选取16S rDNA不同高变区构建的克隆文库具有丰富的种群多样性,Proteobacteria和Actinobacteria为沈抚灌区土壤样品微生物群落中的优势类群。同时通过非培养方法还证实了沈抚灌区土壤样品微生物群落中均含有多种存活但不可培养的细菌。采用选择性富集培养方法和双层平板筛选模型从实验室高浓度柴油胁迫土壤中分离筛选出3株芘降解菌和1株荧蒽降解菌并鉴定其归属。并对其降解特性及共代谢底物在提高多环芳烃降解效率中的作用进行了初步考察。