目的：口腔黏膜癌前病变是发生口腔癌的潜在恶性病变，近年来有发病率上升的趋势，及时的预防和治疗口腔黏膜癌前病变显得尤为重要。口腔粘膜癌前病变的病因错综复杂，癌变机理尚待明确。近年来随着肿瘤分子生物学研究的不断深入，口腔黏膜癌前病变发病机理研究取得一定进展。目前，研究主要集中在口腔黏膜癌前病变与细胞凋亡及增殖、周期调控紊乱关系的研究上。Ki67抗原是与细胞周期密切相关的增殖细胞核蛋白。Ki67高表达是细胞增殖活跃的重要标志。HSP90α受体蛋白与信号转导、细胞周期调控和凋亡路径有关，在肿瘤细胞中过度表达，不仅对肿瘤细胞的保护、维持细胞的稳定有重要的作用，而且在抑制肿瘤细胞凋亡的过程中也发挥着重要的作用。HSP90α和Ki-67的表达可以作为癌前病变的早期诊断和用来作为对药物治疗癌前病变疗效评定的生物学指标。　　 近年来的研究发现，中医中药治疗口腔黏膜癌前病变显示出明显的优势。我们在以往的临床实践中应用中药藓化饮治疗口腔黏膜癌前病变收到较好的治疔效果。为了深入研究中药藓化饮的确切作用机制，本实验通过建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变动物模型，采用免疫组化方法观察中药藓化饮治疗金黄地鼠颊黏膜癌前病变前后HSP90α、Ki-67的表达，分析探讨中药藓化饮对口腔黏膜癌前病的逆转作用，为今后临床应用提供理论基础。　　 方法：　　 1建立动物颊黏膜癌前病变模型选取SPF级LVG叙利亚金黄地鼠55只，鼠龄六周，体质量80g。按完全随机设计方法将动物分为：空白对照组5只和实验组50只。实验组用于建立口腔黏膜癌前病变动物模型，其中又分为癌前病变对照组10只、藓化饮治疗组30只、生理盐水治疗对照组10只。空白对照组不做任何处理，直至实验结束，与其余组一同处死。将实验组50只动物，颊囊黏膜涂以0.5％DMBA丙酮溶液，涂药后禁食禁水2小时，每周3次，连续涂药6周。癌前病变对照组、藓化饮治疗组、生理盐水治疗对照组分别涂致癌剂6周后正常饲养、中药藓化饮灌胃、生理盐水灌胃治疗8周后处死。　　 2动物标本取材1％戊巴比妥钠溶液腹腔注射处死动物后立即取材，取材部位选择在颊囊前外侧、双侧颊囊黏膜分别切取约1.0cm×1.5cm×0.1cm大小病变组织及相邻的部分正常组织。标本10％甲醛溶液固定。　　 3免疫组化染色法检测各组中HSP90α、Ki-67的表达根据SP免疫组化染色试剂盒说明进行。以PBS代替第一抗体的正常口腔黏膜上皮组织免疫组化染色结果作阴性对照。用免疫组化染色法检测各组中HSP90α、Ki-67的表达情况，并分析对比各组之间的差异。Ki67染色评估以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性标准，HSP90α染色评估以细胞核或胞质内出现棕黄色颗粒为阳性标准。采用半定量积分法，将染色强度分为4级：无着色计为0分；淡黄色计为1分；棕黄色计为2分：棕褐色计为3分。按阳性细胞的百分比分5级：小于5％计为0分；5％-25％计为1分；26％-50％计为2分；51％-75％计为3分；大于75％计为4分。每张切片最后的得分为两次评分相加所得的总分，按照：0-1分计为(-)；2-3分计为(+)；4-5分计为(++)；6-7分计为（++）。以（-）定位阴性，以(+)、(++)、（+++）分别定位弱阳性、阳性和强阳性。　　 所有资料应用SPSS13.0统计软件进行统计学分析，P＜0.05具有统计学意义。　　 结果：　　 1.空白对照组地鼠颊囊黏膜表面光滑.呈淡粉色，透亮具有弹性，血管清晰，镜下观察为角化的复层鳞状上皮，上皮和肌层之间为薄层结缔组织及少量散在的纤维细胞和血管。DMBA丙酮溶液六周后，实验组50只动物双侧颊黏膜肉眼观全部为充血、糜烂、条索状皱折等表现。随机切取10例不同肉眼表现的部分病变部位，HE染色后镜下观察地鼠颊黏膜可见不同程度的异常增生，表现为上皮结构异常，上皮分层不规则，基底细胞极性丧失，滴状钉突，核分裂数增加，异常的浅层分裂，单个细胞成熟前角化（错角化）及钉突内出现角化珠等。说明经DMBA丙酮溶液致癌六周后，已成功建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变的动物模型。　　 2.藓化饮治疗后HSP90α、Ki-67在各组免疫组化染色结果HSP90α阳性表达在细胞核或细胞浆，呈棕黄色颗粒状。Ki-67阳性表达主要在细胞核，呈棕黄色颗粒状。癌前病变对照组HSP90α、Ki-67的表达高于空白对照组，有显著性差异(P＜0.05)；癌前病变对照组HSP90α、Ki-67的表达高于藓化饮治疗组，有显著性差异(P＜0.05)；生理盐水治疗对照组HSP90α、Ki-67的表达高于藓化饮治疗组，有显著性差异(P＜0.05)；而藓化饮治疗组HSP90α、Ki-67表达率与空白对照组，无显著性差异（P＞0.05）。　　 统计学分析，两指标表达具有相关性，表达吻合度具有统计学意义。　　 结论：　　 1.应用DMBA成功建立金黄地鼠颊黏膜癌前病变动物模型2.HSP90α、Ki-67在正常口腔黏膜有少量表达，在口腔黏膜癌前病变组织中明显表达。应用中药藓化饮对口腔黏膜癌前病变进行治疗干预后，HSP90α、Ki-67的表达较治疗前降低。　　 3.中药藓化饮对DMBA诱发的金黄地鼠口腔黏膜癌前病变有明显的逆转作用。