非洲菊(Gerbera hybrida)是世界著名的切花之一. 该论文对非洲菊转基因技术体系做了初步的研究,前期以非洲菊R2品种的叶柄外植体作为转化受体进行了初步的遗传转化探索,通过农杆菌介导法转抗虫和抗病的双抗基因GNA+α-PAP,经过卡那霉素筛选后,获得了一些卡那抗性苗,但是经PCR检测后都为阴性,无一株阳性.通过分析,我们认为,要建立非洲菊转基因技术体系,首先要对非洲菊不同品种的不同外植体做农杆菌亲和性实验,从而筛选出适于农杆菌转化的品种和外植体;其次,必须建立一种能快速检测目的基因是否整合到植物体内的检测方法,从而减少后期不必要的工作;再次,在转基因技术体系尚未完善之前,不要急于转目的基因.鉴于此,后期构建了一个以NPTⅡ基因为选择标记基因且串联有带内含子的GUS基因表达载体,以避免GUS基因在农杆菌中的表达,通过检测GUS基因在植物材料中的瞬时表达及整合表达,快速确定不同的非洲菊品种、不同的外植体与农杆菌的亲和性;同时,通过染色强度分析可以优化转化条件,如最佳菌液浓度的选择、共培养时间的选择等.利用这个新构建的表达载体,已从非洲菊13个品种中筛选出了6个与农杆菌亲和的品种;以叶片、茎尖、叶柄、匀浆后的小细胞团为外植体,筛选出匀浆后的小细胞团与农杆菌亲和性最高,结合抽滤的方法可高频率地获得转GUS基因的稳定愈伤.该愈伤GUS组织化学染色为阳性,转化效率高达80％以上.从这种转化愈伤上获得了8株转基因苗,GUS组织化学染色和PCR检测也均为阳性.由此初步建立了一种新的适合于农杆菌介导的非洲菊基因转化技术体系.