有机酸与蛋白质相互作用的光谱学研究

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结合荧光光谱和红外光谱研究了中药有效成分咖啡酸、绿原酸、阿魏酸、没食子酸和莽草酸这些小分子有机酸与血清白蛋白(包括BSA和HSA)的相互作用.通过不同浓度的药物对血清白蛋白内源荧光的猝灭,测定了各有机酸与白蛋白结合反应的结合常数、结合位点数.依据非辐射能量转移理论确定了各有机酸距离白蛋白中色氨酸的距离.结果发现除莽草酸外,各有机酸均与白蛋白有较强的结合,结合位点位于靠近色氨酸的α-螺旋区域,通过静态猝灭和非辐射能量转移共同使白蛋白的荧光猝灭.应用衰减全反射傅立叶变换红外光谱,采用对蛋白质红外光谱的酰氨Ⅰ带和酰氨Ⅲ带进行曲线拟合的方法,定量分析了不同浓度的药物对白蛋白二级结构的影响.结果显示随着药物浓度的增加,白蛋白的α-螺旋含量降低,咖啡酸作用使β-转角增多,阿魏酸和绿原酸则主要使无规卷曲增加,没食子酸作用后β-折叠也明显减少,β-转角和无轨卷曲都增加.总之,与有机酸作用后血清白蛋白分子结构从有序向无序转化.通过比较各有机酸与血清白蛋白的相互作用,结合对白蛋白构象的影响,讨论了结合基团和结合模式,发现各有机酸与血清白蛋白的作用来自酚羟基的氢键、—COO<->的静电作用和苯环的疏水力,为药物设计提供了参考价值.
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