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大豆蛋白是近年肾病营养治疗的研究热点。有研究报道,大豆蛋白具有抑制肾组织细胞氧化应激、降低尿蛋白及纠正脂质代谢异常等作用。但目前国内外对大豆蛋白能否减缓肾功能不全的进展还有争议,对其在防止肾硬化中的作用及其作用机制也无明确的结论。大鼠5/6肾切除可诱导建立肾硬化模型,本研究拟通过该模型观察大豆蛋白饮食对5/6肾切除大鼠残肾组织的影响,并探讨其可能的作用机制。 实验方法 1、选择40只雄性SD大鼠为实验对象,随机分为4组,分别为大豆蛋白组(Soy protein group,Soy)、低蛋白组(Low casein protein group,Casein)、对照组(Control group,Con)以及假手术组(Sham-operated group,So),以5/6肾切除诱导大鼠肾硬化模型,其中Soy、Casein及Con组为5/6肾硬化鼠模型。假手术组仅行麻醉,暴露肾包膜,分离脂肪囊,不做手术切除。 2、术前1天留取各组血、尿标本,检测尿白蛋白、血肌酐、尿素氮、血白蛋白、总蛋白、胆固醇、甘油三酯等指标,次日行右肾切除术,一周后行左肾2/3切除术,术毕缝合腹部切口。 3、术后Soy组、Casein组分别以大豆蛋白饮食(6%大豆蛋白)、低蛋白饮食(6%酪蛋白)饲养。Con组和So组给予普通酪蛋白饮食(20%酪蛋白)。各组饮食饲养12周,于术后第4、8、12周再次留取血、尿标本,并行相关检查,第12周处死各组大鼠,留取肾脏。 4、肾脏病理检查:行HE染色,光镜下观察肾脏病变以及半定量方法评估肾小球硬化程度和肾小管间质病变程度。 5、免疫组化:检测肾组织中NF-κB、MCP-1、RANTES、TGF-β1、α-SMA、FN、ED-1的沉积情况。