湖南黑茶对香烟烟雾曝露诱发小鼠肺氧化损伤的修复研究

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香烟烟雾(Cigarette Smoke, CS)被吸入肺部后,通过氧化应激、炎症反应、改变基因表达等途径导致肺部损伤。黑茶是否能改善CS曝露诱发的肺部氧化应激损伤,还未见相关文献报道。本研究通过将C57BL/6小鼠置于自制的CS曝露箱中,进行9周CS曝露以建立CS致小鼠肺部氧化应激损伤模型,分别灌喂20mg/kg的EGCG,200mg/kg、1000mg/kg的黑毛茶、茯砖茶、千两茶4周。检测各实验组小鼠生存状态;肺组织病理学切片;血清氧化指标;肺组织炎症因子;肺组织Bcl-2、Bax、Jak2、Stat3基因mRNA相对表达,探究黑茶对香烟烟雾所致小鼠肺部氧化应激损伤的修复作用。实验结果表明:(1)C57BL/6小鼠生存质量发生了明显改变。CS造模后与正常对照组小鼠相比较,CS组小鼠进食量明显下降,体重增长速度缓慢;灌喂20mg/kg的EGCG,200mg/kg、1000mg/kg的黑毛茶、茯砖茶、千两茶水提物后,与CS曝露模型组相比较,其生存质量及精神状态有所改善,进食量有一定增加,体重增长速率增加,接近于正常组小鼠。(2)C57BL/6小鼠肺组织切片发生明显改变。CS造模后,C57BL/6小鼠肺泡隔膜增厚、肺泡形状不规则、间距增加、肺泡内微血管充血扩张,支气管纤毛模糊甚至消失,气管内微血管出血,部分肺泡腔内有大量中性粒细胞、巨噬细胞浸润,肺部炎症较严重;灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg、 1000mg/kg黑毛茶、茯砖茶、千两茶后,与CS曝露模型组相比较,各组小鼠肺组织切片肺泡形状较规则,肺泡内血管充血扩张现象有所缓解,支气管部位粘膜完整,纤毛分布较清晰、均匀,偶有少量淋巴细胞浸润,其中200mg/kg黑毛茶、200mg/kg茯砖茶、1000mg/kg千两茶与20mg/kg的EGCG修复效果较好。(3)C57BL/6小鼠血清氧化应激炎性指标发生明显改变。CS造模后,与正常对照组比较,CS曝露组小鼠血清MDA、GSH-Px、MPO含量显著降低(P<0.01), T-SOD含量显著上升(P<0.01);灌喂20mg/kg的EGCG,200mg/kg、1000mg/kg的黑毛茶、茯砖茶、千两茶后,与CS模型组比较,各组小鼠血清MDA、GSH-Px、MPO、T-SOD含量均达到显著性差异(P<0.05);灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg、1000mg/kg黑毛茶,1000mg/kg千两茶后,小鼠血清MDA含量恢复至接近正常对照组水平(66.64±4.01 nmol/mL);灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg、1000mg/kg黑毛茶,200mg/kg茯砖茶,1000mg/kg千两茶后,小鼠血清GSH-Px含量恢复至接近正常对照组水平(1800.00+10.91 U/mL);灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg、1000mg/kg黑毛茶,200mg/kg茯砖茶,小鼠血清MPO含量恢复至接近正常对照组水平(116.59±7.30 U/L)。(4)C57BL/6小鼠肺组织炎症因子发生明显变化。CS造模后,肺组织TNF-α、ROS、IL-8含量显著升高(P<0.01);灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg黑毛茶,1000mg/kg茯砖茶后,小鼠肺组织TNF-a含量与CS模型组(448.90±17.75ng/g)比较,达到显著性差异(P<0.05);所有给茶组的ROS含量与CS模型组(12817.63±247.95 AU/mg prot)均达到显著性差异(P<0.05),其中200mg/kg、 1000mg/kg的黑毛茶灌喂,200mg/kg的千两茶灌喂,恢复至接近正常对照组水平(3284.57±219.00 AU/mg prot);灌喂20mg/kg EGCG、1000mg/kg的茯砖茶后,肺组织IL-8含量恢复至正常对照组水平(95.23±3.06 pg/g)。(5)C57BL/6小鼠肺组织JAK2/STAT3炎性代谢通路有明显变化。CS造模后与正常对照组相比达显著性差异(P<0.05),下调小鼠肺组织Bcl-2 mRNA表达,上调Bax、JAK2及STAT3 mRNA表达;灌喂20mg/kg EGCG,200mg/kg、1000mg/kg黑毛茶、茯砖茶、千两茶后,与CS曝露模型组相比,Bcl-2 mRNA表达升高,Bax、JAK2及STAT3 mRNA表达量均有所下调;与正常对照组比较,均恢复至正常对照组水平。由此可知,CS曝露导致小鼠肺氧化应激损伤,灌喂EGCG、黑毛茶、茯砖茶、千两茶后,小鼠进食量增加、体重基本恢复到正常组水平;肺泡变形、血管充血扩张现象有所缓解,支气管纤毛分布变清晰、均匀,炎性细胞浸润减少;小鼠血清氧化指标含量得到修复;肺组织TNF-α、ROS、IL-8含量降低;小鼠肺组织Bcl-2、Bax、Jak2、Stat3基因mRNA相对表达量得到一定程度调节。因此,灌喂EGCG、黑毛茶、茯砖茶、千两茶对CS诱导的C57BL/6小鼠肺氧化应激损伤有明显的修复作用。
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