【摘 要】
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目的:采用GC-MS分析技术,检测血清中的代谢物丰度及含量,通过比较每组动物的代谢物特征差异,得到膝骨关节炎的特征性代谢标记物,为膝骨关节炎的诊断提供新思路。同时探究铁包金按摩膏联合刮法(药刮法)干预膝骨关节炎,对特征性代谢物的影响,明确其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:应用随机数字表法,从30只实验兔中随机抓取空白组兔,共6只,剩余24只兔进行造模操作。每间隔3天向兔膝关节注射木瓜蛋白酶溶液,持
【基金项目】
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湖南省中医管理局课题:“药刮法”对膝骨关节炎代谢组学的协同机制的影响研究,编号:202107;
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目的:采用GC-MS分析技术,检测血清中的代谢物丰度及含量,通过比较每组动物的代谢物特征差异,得到膝骨关节炎的特征性代谢标记物,为膝骨关节炎的诊断提供新思路。同时探究铁包金按摩膏联合刮法(药刮法)干预膝骨关节炎,对特征性代谢物的影响,明确其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:应用随机数字表法,从30只实验兔中随机抓取空白组兔,共6只,剩余24只兔进行造模操作。每间隔3天向兔膝关节注射木瓜蛋白酶溶液,持续1周,共进行3次操作。完成操作2周后,随机抽取1只模型兔,通过比较兔膝关节活动度、肿胀情况及软骨滑膜组织形态学,进行模型验证。造模成功后,将剩余模型兔随机分为模型组、药刮组、铁包金组、刮法组,再进行标准干预。五组兔均标准喂养,空白组及模型组不做干预;铁包金组取对应治疗量的铁包金按摩膏,均匀的敷在兔右后肢膝关节上,保持1h后擦去;刮法组用水湿润兔右后肢膝关节皮肤,进行刮法操作;药刮组敷药之后,再进行刮法操作,完成操作后保持1h后擦去;所有干预均隔日进行1次。统一观察并记录一般情况,标准干预1月后,心脏取血制备血清进行代谢组学分析,应用随机森林法处理寻找各组间的差异性代谢物,并取关节软骨及滑膜进行形态学观察与评分。结果:1.根据改良Lequesne MG评分:模型组关节软骨轻度退变,与空白组评分比较,P<0.05。铁包金按摩膏组基本正常,与模型组比较,P<0.05。2.通过向兔膝关节注射木瓜蛋白酶溶液成功造成KOA病理模型,血清中共筛选出多种代谢差异物,对特征性高的的赤藓糖,乳酸、葡萄糖、花生四烯酸、草酸、肌醇进行分析,发现兔KOA模型血清中代谢物发生了动态变化。结论:基于代谢组学发现血清中改变的赤藓糖,乳酸、葡萄糖、花生四烯酸、草酸、肌醇可以作为诊断KOA潜在和生物标志物,以及中药治疗KOA疗效标志物。药刮法治疗膝骨关节炎可能是作用于丙酮酸盐代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、糖酵解/糖异生三条通路达到治疗效果,这可能是铁包金按摩膏联合刮法治疗KOA的机制之一。
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