VEGF、皮片延迟对带真皮下血管网皮片成活率影响的实验研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuhua_ly
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目的:1.探讨真皮下注射血管内皮生长因子(VEGF)和外科延迟是否可以提高带真皮下血管网皮片术后成活率;2.观察术后皮片真皮下血管网内径、及横断面及数目的变化;3.探讨内源性生长因子VEGF对皮片中平均微血管数量的变化及肾上腺髓质素(ADM)在皮片延迟过程中对皮下血管的形成的作用机制。方法:设计大鼠带真皮下血管网皮片延迟模型,真皮下注射VEGF模型,及延迟和皮下注射叠加模型,观察术后皮片的组织学变化及皮片成活率;通过酶联免疫检测技术(Elisa)对延迟模型皮片组织组织匀浆VEGF定量分析;统计学分析VEGF及肾上腺髓质素(ADM)在皮片延迟手术后的表达情况的变化是否与真皮下血管网变化呈相关性。结果:1、皮片真皮下注射VEGF组,显微镜下观察到在注射点周围新生血管芽明显增多;2、皮片延迟组真皮下血管管径明显增粗;3、延迟及叠加组可见大量血管芽并且真皮下血管内径明显增粗;4、皮片的成活率:生长因子注射组、叠加组术后皮片成活率明显高于生理盐水组(P<0.05);延迟组及生长因子组无显著差异(P>0.05);叠加组较其它实验组有显著差异(P<0.05);5、与盐水组比较,延迟模型中VEGF的含量在皮片延迟术后3天开始增加,第7、14显著高于基础值(P<0.05),第14天回落至基础值水平。6、经RT-PCR检测延迟皮片ADMmRNA的含量,3天时逐渐增高,在6、9天时达峰值,随后其表达含量逐渐下降;7、双抗体夹心酶联免疫吸附法(Elisa)检测大鼠外周血和延迟创面组织中ADM的含量,并与延迟相应时间点的皮片平均血管内径(MVD)做相关性分析,结果并无显著相关性。结论:1、大鼠真皮下注射VEGF能促进局部血管内皮生长,其生物学效应是促进新生血管芽的形成;2、进行四周离断处理的延迟模型可以促进皮片下血管内径的增、相对于对照组可以明显提高皮片的成活率;3、真皮下注射VEGF及外科延迟模型均可以有效提高带真皮下血管网皮片术后成活率,但是两者的作用机制不同;4、叠加组可以进一步提高皮片术后的成活率;5、经酶联免疫(Elisa)检测延迟过程中VEGF的含量的表达在延迟处理的过程中发生变化,说明皮肤在缺氧、缺氧的环境下,内源性VEGF对组织创伤修复的过程起到了重要的作用;6、皮肤组织由于受到创伤后导致皮片内部缺血、缺氧,ADMmRNA在皮片表达含量有所变化,说明ADM在组织皮肤创伤修复的过程中发挥一定的作用;7、经酶联免疫(Elisa)检测外周血与局部皮片组织匀浆中ADM的含量,发现ADM的表达与相应延迟时间皮片内部血管内径的变化无显著相关性,提示在延迟处理的动物模型中,ADM与真皮下血管网的再构筑并无显著关联性;
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