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石斛作为一味传统中药材,也是卫生部公布的药食同源物品,其药用价值数千年来为人们所推崇,铁皮石斛为石斛之上品,由于生长环境苛刻及显著的滋阴扶正功效而被列为“中华九大仙草”之首。铁皮石斛中含有的主要活性成分为多糖类、石斛碱、多种氨基酸、芪类及其衍生物以及多种挥发性成分。现代医学研究证明,铁皮石斛具有养阴生津、提高机体免疫力、降低血糖、抗氧化、抗肿瘤等作用,对胃肠道疾病、恶性肿瘤、糖尿病及白内障等具有很好的疗效,因此,被国际药用植物界称为“药界大熊猫”。目前铁皮石斛的研究主要集中在铁皮石斛的种质鉴定、快速组织培养方法的研究上,对铁皮石斛多糖等功效成分的研究还多处于提取和结构分析上,关于其结构与功能活性关系的研究报道还很少,特别是生物活性与其物质基础之间的关系。因此,运用现代免疫学和分子生物学的理论和技术从细胞、分子、基因水平深入研究铁皮石斛对免疫调节过程中的免疫细胞、免疫分子的影响,探讨铁皮石斛调节机体免疫功能的可能机制,对进一步了解铁皮石斛的免疫药理学作用具有重要的理论意义和临床价值。本研究的主要内容如下:以小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞为研究对象,探讨了铁皮石斛及其多糖对巨噬细胞功能的影响。结果发现,铁皮石斛水提物、粗多糖、纯多糖均能够显著促进巨噬细胞增殖,无细胞毒性;增强细胞吞噬功能;上调活性氧NO及细胞因子肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素-6、-12的分泌,进一步利用RT-PCR和Western blot技术从细胞因子mRNA水平、iNOS蛋白水平论证铁皮石斛对细胞因子及活性氧的释放是在翻译、转录水平调控的。以铁皮石斛粗多糖为代表,研究发现这种调控作用与核转录因子NF-κκB的激活密切相关。对比铁皮石斛水提物组与多糖组,发现多糖组剂量依赖性地增强TNF-α,IL-12的分泌,而水提物组在数量上表现为上调TNF-α,IL-12的分泌,但调节方式上则剂量依赖性地下调TNF-α,IL-12的分泌,且水提物组对其它免疫学指标的促进能力多低于铁皮石斛多糖组,说明铁皮石斛发挥免疫调节作用的有效成分是铁皮石斛多糖。以小鼠脾淋巴细胞为研究对象,研究了铁皮石斛多糖对脾淋巴细胞功能的影响。结果表明,铁皮石斛多糖可非常明显地促进小鼠脾淋巴细胞自然增殖;促进由有丝分裂原刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖,而对LPS诱导的B淋巴细胞增殖无明显影响;显著上调CD3+、CD4+T淋巴细胞百分率、CD4+/CD8+比值;上调细胞因子IL-2、IL-4的分泌,表明铁皮石斛多糖能够增强细胞免疫功能,提示直接激活T淋巴细胞可能是铁皮石斛多糖发挥免疫增强作用的一种方式。上述研究表明,铁皮石斛发挥免疫活性的有效成分是铁皮石斛多糖,铁皮石斛多糖无论对非特异性免疫还是特异性免疫均有良好的促进作用,能从免疫系统的多个方面来提高机体的免疫力,其具体的免疫调节机制还有待进一步研究。