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三七[Panax Notoginseng(BurK.)F.H.Chen],又名参三七,田七,为五加科人参属多年草本植物,是一种用途比较广泛的名贵中药,主要分布于我国西南部。三七具有止血、活血、补血、抗冠心病、提高记忆力、滋补等作用。迄今为止,三七皂苷的生物活性研究鲜见报道,本论文在提取三七皂苷的基础上,重点对三七皂苷的生物活性进行了研究。
建立了三七总皂苷的质量控制方法。采用薄层色谱法对三七总皂苷进行定性鉴别,香草醛-高氯酸分光光度法测定皂苷的含量,检测波长为560 nm,人参皂苷Rg1在0.0083-0.050mg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.9994),平均回收率为99.5%(n=6),RSD=2.7%。本方法简便、准确、重现性好,可用于控制三七总皂苷的质量。
采用正交设计法对三七皂苷超声波辅助提取法和乙醇回流提取法的工艺条件进行了研究。确定乙醇回流提取法工艺为:料液比为1:10,70%乙醇(V/V)提取3次,每次提取时间1.5 h。超声波辅助提取法工艺条件为:料液比1:12,水饱和正丁醇超声提取2次,每次提取时间50 min,温度为40℃。
研究了大孔树脂吸附分离、纯化三七总皂苷的工艺,考察了三种不同类型的树脂对三七总皂苷的静态吸附-洗脱性能的影响,对洗脱溶媒及其用量、吸附容量等纯化工艺参数进行了研究。结果表明,选用D101型大孔树脂,以70%乙醇(V/N)为洗脱液,三七总皂苷的洗脱率达89.5%。
通过测定红细胞溶血率,研究了不同部位三七皂苷及三七块根总皂苷(PNS)的溶血性。结果表明:不同部位三七皂苷中,PNS溶血性最小,PNS及流分中,PNS及PNS-1、PNS-2、PNS-5、PNS-6溶血性极小,PNS-3、PNS-4的HD50分别为1060μg/mL和234μg/mL;PNS及流分的溶血性均较小,安全性较大;随PNS各流分的极性增加,溶血性降低;若需增加其安全性,可去除极性较小的部分。
通过体外免疫试验对不同部位三七皂苷的免疫活性进行了研究,结果表明,PNS及其各流分的体外活性显著。