论文部分内容阅读
前期研究发现CNTF具有保护海马神经元应激性损伤的快速作用,但其快速通路的构成尚不清楚。为了探索CNTF快速通路中主要构成单元,本研究以NMDA诱发海马神经元损伤模型,运用活细胞连续照相、全细胞膜片钳、细胞内游离钙离子浓度测定等方法,观察CNTF对海马神经元的快速保护作用及Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对快速保护作用的影响。主要研究方法:1、用活细胞连续照相的方法观察CNTF的细胞保护作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对保护作用的影响。2、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对海马神经元兴奋性的影响。3、用全细胞膜片钳的方法观察CNTF对NMDA诱发INMDA的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。4、用共聚焦显微镜细胞内游离钙离子测定的方法观察CNTF对NMDA诱发[Ca2+]变化的作用,Anti-CNTFRα及PTPi-2对该作用的影响。根据实验结果得出主要结论如下:1.活细胞连续照相结果显示,CNTF具有细胞保护作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的保护作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的保护作用。2.全细胞膜片钳结果显示,CNTF对海马神经元兴奋性无显著影响,但对NMDA诱发电流有快速抑制作用。Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。3.细胞内游离钙离子浓度测定结果显示,CNTF对NMDA诱发细胞内游离钙离子浓度升高有快速抑制作用,Anti-CNTFRα可以阻断CNTF的抑制作用,但PTPi-2不能阻断CNTF的抑制作用。综上所述,通过研究Anti-CNTFRα和JAK/STAT通路阻断剂PTPi-2对CNTF快速作用的影响,可推测CNTFR、NMDAR和钙离子参与了CNTF快速通路的构成,而JAK/STAT通路不参与CNTF快速通路的构成。