中华蚱蜢配子发生中凝集素受体的分布变化与原癌基因的表达定位

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该论文以中华蚱蜢作为研究对象,对其配子发生过程中花生凝集素受体的分布变化与原癌基因c-kit的表达进行了定位研究,此外还采用HE染色法对其雌性受精囊和雄性附性腺的显微结构进行了光镜观察.该文首次采用生物素标记的花生凝集素(PNA)对中华蚱蜢配子发生过程中细胞质膜的糖蛋白(含有糖基Gal-β-(1,3)-GalNAC)进行了标记,旨在认识配子发生过程中细胞质膜糖复合物的形成与变化规律,探讨其所具有的功能.结果表明:(1)在中华蚱蜢的精子发生中,PNA受体是由初级精母细胞合成,然后转移到膜上,在次级精母细胞,由于量的积累其质膜出现了强阳性标记;从早期精子细胞到成熟精子时期糖蛋白的分布发生了明显的修饰变化,这些变化与精子获得与卵子进行识别、粘附、结合等受精能力密切相关;受精囊内与精巢内的精子表面的标记是相同的,说明质膜糖蛋白的修饰作用在精巢内就已完成.(2)在中华蚱蜢卵子发生的早期,PNA受体是由卵母细胞自身合成;在卵黄发生前的准备时期,卵母细胞质中的PNA受体一部分来源于自身合成,另一部分则来源于滤泡细胞,而糖复合物的大量出现可能直接与卵黄发生有关;卵黄发生期PNA受体的减少可能是在卵黄物质形成中部分发生了修饰;卵黄和卵壳的相继形成过程中,阳性反应的出现说明PNA受体参与了卵黄膜及卵壳的形成,而这些受体物质是由滤泡细胞分泌的.该文首次采用免疫组织化学方法,研究了原癌基因c-kit在中华蚱蜢配子发生中的特异表达.结果表明:(1)在A型精原细胞的质膜和成熟的精子头部有强阳性反应,早期精子细胞质膜有较强的阳性反应.在A型精原细胞,C-KIT/SCF可能通过rapamycin和wortmannin敏感的PI3-K/AKT/P70S6K途径上调CyclinD3,促进细胞周期进程,引起细胞增殖.成熟精子头部的阳性反应可能与tr-kit的表达有关.(2)卵子发生中,进入生长期的卵母细胞,从第三阶段开始出现c-Kit蛋白的表达,随着生长发育胞质表达增强,胞膜也开始表达,在第四阶段后期出现最大量的表达,而此后卵黄发生的第五阶段却呈现完全的阴性表达,推测c-kit的表达主要调节卵母细胞的生长和由激素控制的卵黄发生的起始.卵母细胞的第六阶段及第七阶段的弱阳性反应主要存在于卵母细胞与滤泡细胞之间,可能与卵母细胞的成熟有关.对中华蚱蜢雄性附腺的显微观察显示,中华蚱蜢的雄性附腺左右对称,各由15根腺管组成,根据分泌物可分为五种类型;储精囊为细长的管状,左右各一根,和附性腺缠绕在一起.附性腺的组织结构皆由上皮组织、基膜、肌肉层和围脏膜构成,其分泌物的颜色和状态各不相同,这与它们的功能密切相关.
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