目的:恶性肿瘤是威胁人类生命健康的重大疾病,传统的手术治疗、化学药物疗法、放射疗法和免疫疗法等虽然各有优势,但在应用中也存在诸多局限,并不能完全满足需要。因此,开发特异性好和疗效高的抗肿瘤药物仍然十分必要。RNase作为一类广泛存在的具有细胞毒性作用的天然酶类,逐渐显示出作为抗肿瘤药物的潜力。已有研究表明在不同条件下不同的RNase具有促癌或者抑癌的多重作用,但是其具体功能机制尚有待进一步阐明。为此,本文以人非小细胞肺癌A549细胞为模型,深入研究RNase A对A549细胞不同生物学行为和功能的影响,揭示其作用机制,为研发基于RNase的抗癌药物提供理论基础。此外,本文初步研究了RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响,以期为进一步阐释RNase A与细菌感染间的关系提供基础。方法:1.RNase A对A549细胞生物学行为和功能的影响:1)分别通过光学显微镜和激光共聚焦扫描显微镜观察RNase A处理对A549细胞形态的影响。2)通过Transwell法检测不同浓度RNase A处理对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。3)利用细胞球形成实验检测不同浓度RNase A处理对A549细胞成球能力的影响。4)采用CCK-8法检测不同浓度RNase A处理对A549细胞增殖的影响。5)采用CCK-8法检测不同浓度RNase A联合化疗药物阿霉素、顺铂对A549细胞杀伤作用的影响。2.RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响:1)分别采用LB和M9培养基培养经不同浓度RNase A处理的大肠杆菌DH5α,绘制生长曲线以检测RNase A对DH5α增殖的影响。2)采用RNase A预处理LB培养基,检测RNase A对DH5α增殖的影响。3)利用菌落形成实验检测RNase A对DH5α菌落形成能力的影响。结果:1.RNase A对A549细胞生物学行为和功能的影响:1)RNase A处理使A549细胞呈现生长离散现象,促进了细胞表面伪足的增加。2)低、中浓度RNase A处理对A549细胞的侵袭转移能力有明显的促进作用。3)RNase A处理抑制A549细胞球形成。4)低浓度RNase A促进A549细胞的增殖水平,高浓度RNase A抑制其增殖水平。5)RNase A与化疗药物阿霉素、顺铂联合使用对A549细胞的杀伤作用具有累加效应。2.RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响:1)在LB和M9培养条件下,不同浓度RNase A均能促进DH5α的增殖水平。2)RNase A处理促进DH5α的菌落形成能力。结论:RNase A体外处理改变A549细胞多种生物学行为和功能,这可能是RNase A通过不同的途径行使了不同的功能所造成的,其内在机制有待进一步研究。另外,在LB和M9培养条件下,RNase A可以促进大肠杆菌DH5α的增殖水平,其作用机制有待进一步阐明。