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第一部分：台州地区原发性耐药HIV-1毒株流行率及基因变异研究背景高效联合抗逆转录病毒治疗(HAART)的广泛应用大大降低了HIV/AIDS患者的发病率和死亡率,患者生存质量得到显著改善,但随之产生的病毒耐药性,已成为抗病毒治疗失败的主要原因。HIV基因型耐药性检测方法是检测病毒耐药情况,进而指导临床治疗及治疗失败后更换治疗方案的重要技术手段。目的通过对台州地区HIV/AIDS患者的原发性耐药研究,了解该地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者原发性耐药毒株流行情况,掌握蛋白酶和逆转录酶基因耐药性突变发生的类型、频率和临床意义以及系统发生情况,为更有效地开展高效抗逆转录病毒治疗提供参考。方法采集台州地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者的抗凝全血,分离血浆。采用基因型耐药检测方法,通过逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)扩增HIV-1pol区的蛋白酶基因全序列与逆转录酶基因部分序列。序列测定结果提交至美国斯坦福大学HIV耐药数据库http://hivdb.stanford.edu进行耐药突变分析；·登陆Web站点http://www.hiv.lanl.gov初步判定亚型,使用MEGA5.1软件进行系统发生分析。结果共获得453例HIV-1分离株的pol基因序列,经基因型耐药检测发现12例患者出现耐药,耐药发生率为2.6%；此外,另有22例患者存在潜在耐药。蛋白酶抑制剂耐药率为0.9%(4/453),主要耐药突变包括M46I、V82A和L90M；核苷类逆转录酶抑制剂耐药率为1.5%(7/453),耐药基因突变包括A62V、T69N、M184V和T215S；非核苷类逆转录酶抑制剂耐药率为0.7%(3/56),耐药基因突变包括K103N、Y188I和G190A。亚型分析表明,台州地区HIV-1毒株主要分布在6个不同亚型,53.4%(242/453)为CRF01_AE亚型,.19.9%(90/453)为CRF07_BC亚型、12.6%(57/453)为B/B’亚型和11.9%(54/453)为CRF08_BC亚型,C亚型9例,A1亚型1例。结论浙江省台州地区未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者原发性耐药情况仍处于低水平的流行状态,患者对现有的抗病毒药物敏感。应尽快开展对于HIV耐药基因突变的研究,定期进行HIV耐药性监测,注意未经抗病毒治疗的HIV/AIDS患者原发性耐药株的流行与传播,及时合理采取治疗方案。第二部分：台州地区HIV-1耐药毒株在艾滋病抗病毒治疗人群中的流行及演变背景高效抗逆转录病毒治疗(HAART)以其良好的病毒抑制效果,作为治疗艾滋病的最主要手段被广泛应用。在抗病毒药物的选择压力下,耐药性病毒株迅速产生,严重影响抗病毒治疗效果。尽管我国已经开展了多次HIV耐药的横断面研究,但是队列研究不多。目的通过对台州地区接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者进行随访研究,了解台州地区艾滋病患者抗病毒治疗后耐药发生情况和水平,探索继发性耐药的发生发展规律,了解耐药性HIV-1毒株的分子进化特征,丰富对耐药相关突变的认识,为提高艾滋病抗病毒治疗效果奠定基础。方法队列研究对象为浙江省台州市2008年1月至2011年12月期间开始接受抗病毒治疗的HIV/AIDS患者,定期进行CD4+T淋巴细胞计数和病毒载量检测。对病毒载量>1000copies/ml的样本在其治疗前、治疗后6个月、9个月、12个月、18个月、24个月、36个月直至最后一次的血样采集,进行基因型耐药检测,分析不同时间点耐药突变发生和演变情况。结果247例抗病毒治疗的HIV/AIDS患者中33人(13.4%)在随访期间出现病毒载量大于1000copies/ml,其中19例出现继发性耐药,总耐药率为7.7%(19/247),HIV病毒载量大于1000copies/ml的患者中发生耐药的比例为57.6%(19/33)。针对NRTIs和NNRTIs的耐药率分别达到5.7%(14/247)和7.3%(18/247),没有发现针对PIs的耐药。患者发生耐药突变的时间中位数是4.5个月,针对NRTIs耐药的发生时间中位数为7.5个月,针对NNRTIs耐药的发生时间中位数为4.5个月。NRTIs耐药突变中M184I/V出现频率最高为42.4%(14/33),其次是T215Y/F为24.2%(8/33); NNRTIs耐药突变中K103N、Y18lC、G190A出现最多,分别为24.2%(8/33),21.2%(7/33),27.3%(9/33)。结论浙江省台州地区接受抗病毒治疗的艾滋病患者总体疗效良好,但HⅣ-1耐药毒株在台州地区艾滋病抗病毒治疗人群中处于中度流行水平,耐药株的演变现象复杂。在开展抗病毒治疗后必须遵守严格的程序并保持较好的依从性,定期进行耐药性检测,及时评估治疗失败者耐药性情况,必要时提供二线药品,减少HIV病毒耐药株的产生与传播,保障抗病毒治疗的有效进行。