P16基因导入对人膀胱癌细胞生长影响的实验研究

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本研究的主要目的是检测复制缺陷型腺病毒介导的p16基因 转染对人膀脱癌细胞生长的影响。 我们用人胚胎肾293细胞株扩增p16重组腺病毒帆(Ad-p16); 将p16腺病毒感染p16蛋白表达阴性的人膀胱移行细胞癌T24细 胞株;用Ad-LacZ检测了重组腺病毒的转染效率;用Western-blot analysis及流式细胞仪检测了p16蛋白的表达;用细胞计数及MTT 法评估了Ad-p16对T24细胞增殖的影响作用;用银染法和流式细 胞仪检测了p16蛋白表达对生长和凋亡相关蛋白AsNORs、p53和 PCNA的表达的影响。 实验结果表明:1、在MOI为50时,即可获得对T24细胞较 高的转染效率。2、此Ad-p16在T24细胞中可获高效表达。3、p16 基因的表达通过G1-S节点抑制了T24细胞的生长。4、p16基因导 入对AgNORs和PCNA的表达有负面影响,对p53蛋白表达没有影 响。
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