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研究目的本论文旨在对猫爪草粗多糖进行系统的分离,以期得到的猫爪草多糖组分、多糖亚组分和均一多糖成分,并对分离产物进行理化性质的测定,同时采用体内和体外模型,评价猫爪草粗多糖、多糖组分、多糖亚组分和均一多糖成分的抗肝损伤和免疫调节活性,为今后猫爪草多糖的研究和开发提供实验依据,以及为“灵猫方”的开发奠定基础。实验方法实验中采用水浴提取/煎煮、醇沉、透析和冷冻干燥等方法,制备猫爪草粗多糖;采用DEAE-纤维素、Sephadex G-100和Sephadex G-50柱层析对粗多糖进行系统的分离和纯化;通过测定糖醛酸含量、糖含量、分子量分布和单糖组成,确定粗多糖、多糖亚组分和均一多糖成分的理化性质;采用红外光谱和核磁共振图谱对均一多糖成分进行化学结构的表征。采用ConA诱导肝损伤模型,评价猫爪草多糖对整体动物的保肝活性;采用人L-O2细胞评价多糖在体外促进肝细胞增殖和对抗ConA或H2O2诱导的肝细胞损伤的活性;采用HepG2.2.15肝细胞评价猫爪草多糖对乙肝抗原分泌的抑制活性;采用小鼠原代脾细胞评价多糖对脾细胞增殖和分泌细胞因子的影响。结果（1）猫爪草药材经过水浴提取/煎煮、醇沉、复溶、透析和冷冻干燥,获得猫爪草粗多糖RTP-60和RTP-60-100,提取率分别为3.84%和0.43%,糖含量分别为84.05%和64.90%。RTP-60由峰高分子量为2297Da和峰高分子量为639Da的两个色谱峰组成,其单糖摩尔比为阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳糖∶甘露糖=1.00∶7.05∶0.94∶0.15;RTP-60-100由峰高分子量为8.67×104Da的色谱峰和峰高分子量为1.30×104Da的色谱峰组成,其单糖摩尔比为木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶鼠李糖∶半乳糖∶甘露糖=0.06∶1.00∶8.00∶0.03∶0.28∶0.07。（2）猫爪草粗多糖RTP-60经DEAE-纤维素（阴离子交换）柱层析初步分离,得到两个多糖组分RTP-60-A和RTP-60-B,收率分别为33.91%和4.89%,糖含量分别为96.98%和54.28%。RTP-60-A主要含一个峰高分子量为2660Da的多糖峰且其仅由葡萄糖构成;RTP-60-B由峰高分子量为2577Da（主）、1.48×104Da和6.91×104Da的三个色谱峰组成,其单糖摩尔比为木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳糖∶甘露糖=0.03∶1.00∶2.04∶0.62∶0.04。（3）猫爪草粗多糖（RTP-60-100）经DEAE-纤维素（阴离子交换）柱层析初步分离,获得两个多糖组分RTP-60-100-A和RTP-60-100-B,收率分别为19.7%和4.27%,糖含量分别为99.00%和53.22%。RTP-60-100-B的糖醛酸含量为13.40%。RTP-60-100-A由峰高分子量为3091Da的色谱峰和峰高分子量为822Da的色谱峰组成,其单糖摩尔比为木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳糖=0.03∶1.00∶5.63∶0.07;RTP-60-100-B含有2个色谱峰,其中一个峰高分子量为8.23×104Da,另一个峰高分子量为3859 Da,其单糖摩尔比为木糖∶阿拉伯糖∶葡萄糖∶鼠李糖∶半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖醛酸=0.01∶1.00∶0.25∶0.02∶0.17∶0.01∶0.02。（4）多糖组分RTP-60-A和RTP-60-B分别经SephadexG-50和SephadexG-100凝胶柱层析分离和纯化,获得分子量均一的多糖RTP-60-I和RTP-60-II,峰高分子量分别为2780Da和4802Da。RTP-60-I主要为α构型的葡聚糖,其可能的连接方式有（1→）,（1→6）,（1→4）,（1→4,6）。RTP-60-II主要为α构型的多聚糖,RTP-60-II的单糖摩尔比为阿拉伯糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶23.57∶0.86。（5）猫爪草粗多糖RTP-60和RTP-60-100均能对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠（该模型与乙肝病毒感染的肝损伤有相似性）起到保护作用,能明显提高肝损伤小鼠的存活率,明显减少小鼠肝细胞坏死区域,减少肝细胞炎症损伤,促进肝细胞的分裂和增殖,且RTP-60的作用效果要强于RTP-60-100。（6）猫爪草粗多糖（RTP-60、RTP-60-100）多糖组分（RTP-60-A、RTP-60-100-B）、多糖亚组分（RTP-60-A-a、RTP-60-A-b、及RTP-60-B-a、RTP-60-B-b）体外在50250μg/mL浓度均能促进人L-O2肝细胞的增殖;RTP-60、RTP-60-100、RTP-60-A、RTP-60-100-B及RTP-60-B-b体外在250μg/mL浓度均能抑制高浓度ConA对肝细胞造成的损伤和死亡,且作用效果良好;猫爪草均一多糖RTP-60-II体外在250?g/mL浓度能促进L-O2增殖,且体外在浓度250?g/mL情况下,有明显的抗ConA肝损伤活性。（7）体外实验中,猫爪草粗多糖RTP-60在100、250?g/mL浓度下能抑制高浓度H2O2对肝细胞造成的损坏和死亡,且作用效果良好;RTP-60-100仅仅在250?g/mL能抑制高浓度H2O2对肝细胞造成的损坏和死亡。猫爪草多糖组分RTP-60-B及猫爪草多糖亚组分RTP-60-B-b在100和250?g/mL浓度下均能抑制高浓度H2O2对肝细胞造成的损坏和死亡,且作用效果良好。（8）体外研究发现,猫爪草粗多糖RTP-60对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg均有明显抑制作用;而粗多糖RTP-60-100只有在浓度为500μg/mL时对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg有抑制作用。（9）体外免疫实验研究发现猫爪草粗多糖（RTP-60、RTP-60-100）、多糖组分（RTP-60-A、RTP-60-B、RTP-60-100-B）对原代小鼠脾脏细胞均有明显的促进增殖活性。（10）猫爪草粗多糖RTP-60和RTP-60-100均能促进小鼠脾细胞分泌IFN-γ,且均在浓度为250μg/mL时促进作用最强。猫爪草粗多糖RTP-60在10?g/mL的浓度情况下,能够促进腹腔巨噬细胞分泌TNF-α。结论猫爪草粗多糖、多糖组分和多糖亚组分、均一多糖成分具有明显抗肝损伤和免疫调节活性。