二色补血草多糖提取及分离纯化工艺研究

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二色补血草是白花丹科,补血草属植物中的一种。又名燎眉篙、扫帚草等,带根全草入药,能补血、止血、温中健脾、滋补强壮,主治月经不调、功能性子宫出血、宫颈癌、肾孟肾炎、尿血、诸症体弱等。鉴于二色补血草在医学上有多种用途而在活性成分多糖分离纯化领域研究较少这一现实,本研究以陕南秦巴山区的二色补血草为对象,重点对其中多糖的提取、纯化工艺以及抗氧化活性进行了一定的研究。主要研究成果如下:通过水提和超声两种提取方法对二色补血草中多糖的提取工艺进行了对比研究,并优化了提取工艺参数。水提法优化工艺条件为:料液比16.2(mL/g),提取温度83℃,提取时间1.8h,提取次数为2次,优化提取条件下多糖提取率达到1.731%;超声法优化工艺条件为:超声时间61min,温度85℃,超声功率85W,液料比为11(mL/g),提取次数2次,优化条件下多糖提取率达到1.879%。研究结果表明超声法具有提取时间短、提取率较高等特点,但超声法有可能会对多糖结构造成一定的影响。通过三氯乙酸法、Sevage法、木瓜蛋白酶法和木瓜蛋白酶-Sevage法等4种方法对二色补血草多糖脱蛋白工艺进行了对比研究,结果表明木瓜蛋白酶-Sevage法最为理想,该法的最佳工艺条件为:酶用量2%,酶解温度75℃,酶解时间2h,pH=7,蛋白脱除率为83.72%,多糖保留率为80.25%。通过双氧水氧化法、活性炭吸附法、反胶束溶液法和大孔树脂吸附法等4种方法对二色补血草多糖脱色工艺进行了研究,结果表明双氧水法脱色效果最为理想。该法最佳工艺条件为:温度55℃,时间2h,pH=8.5,样液比1.5,在优化工艺条件下,多糖色素脱除率为87.75%,多糖保留率为87.97%。通过二色补血草多糖的抗氧化性初步试验结果表明,该多糖能够有效清除超氧阴离子和羟基自由基,在测试的浓度范围内,所得的最高清除率分别为69.21%和61.78%。且随着多糖浓度的增加,抗氧化性会不断增强,随着对多糖纯度的提高,清除率也随着显著提高。
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