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目的:生物治疗是近年来重又兴起的治疗方法。应用无菌蛆促进伤口愈合,为体表难治性创面提供了一种有效的手段。中药托里生肌解毒法在辅助治疗溃疡中经过数千年的验证同样具有稳定确切的疗效。本研究希望通过这两种方法的结合探讨其对糖尿病大鼠体表溃疡动物模型的治疗作用及其作用机理,研究其对糖尿病皮肤损伤及病理学等超微结构的干预作用,从而为寻找治疗糖尿病体表溃疡理想可靠的中药方剂提供靶向。
方法:3月龄雄性普通级SD大鼠,按75mg/kg注射链脲佐菌素(Sigma,临用前溶解在0.01mmol/L的枸橼酸缓冲液中,PH4.2),其余10只大鼠给予等剂量枸橼酸缓冲液腹腔注射。1周后当动物血糖浓度≥16.7mmol/L时,糖尿病模型复制成功,取30只作为实验组,并以正常SD大鼠10只为正常对照组。以5﹪盐酸氯胺酮注射液(50mg/kg)腹腔推注麻醉后,背部剃毛,常规消毒。在无菌条件下用特制打孔器在鼠背中部脊柱上下两处各打一圆孔,深至皮下,直径1.8cm,创面面积为2.54cm2。各组大鼠每天灌胃给药一次,连续4周。中药治疗组(TLSJ+DM)喂以托里生肌1号方3ml/只/d;单纯蛆疗组(MDT+DM)、正常对照组(NORM)和模型对照组(DM)均喂以生理盐水3ml/只/d。每日分别以蛆分泌物、生理盐水各1.5ml湿敷中药治疗组,单纯蛆疗组创面,上部创面湿敷蛆分泌物、下部创面湿敷生理盐水。每隔4天检测各组动物残余创面面积并记录创面愈合时间;伤后7、14、21天取创面组织,在光学显微镜下不同创面的病理学改变,用免疫组织化学方法监测各组肉芽组织中bFGF(碱性成纤维细胞因子)、CTGF(结缔组织生长因子)的表达。监测大鼠血糖及体重、尿量的变化,并进行皮肤组织学检查。
结论:1、托里生肌1号方对糖尿病大鼠皮肤溃疡的蛆分泌物治疗有良好的协同作用,能显著改善症状,加速溃疡愈合。2、托里生肌1号方组方合理,其托里生肌的作用机理主要是通过提高局部组织免疫力,提高创面中碱性成纤维生长因子bFGF、结缔组织生长因子CTGF的表达,促进了胶原纤维的合成,加速肉芽组织填充,对改善修复最终结局有一定的作用。