HBV携带者血清HBVDNA及其标志物与肝组织cccDNA相关性的研究

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目的乙型肝炎病毒(HBV)感染的分子生物学研究表明,在HBV持续性感染、治疗停止后病情复发以及耐药等方面,共价闭合环状DNA(cccDNA)起着关键的作用。本研究通过测定30例经肝组织活检病理检查确定为HBV携带者的肝组织cccDNA定量、HBVtDNA定量、血清HBVDNA定量、HBsAg和HBeAg定量,以探讨其之间的关系。方法30例HBV携带者均来自我院2007年5月-2008年2月在我院行肝活检患者,男17例,女13例,年龄17-36岁,平均22.6岁,ALT均小于40U/L。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肝组织cccDNA、HBVtDNA定量和血清HBVDNA定量,同时用化学发光免疫分析法定量检测HBsAg、HBeAg定量。肝组织进行炎症活动度分级(G)及纤维化程度分期(S)。用SPSS统计软件12.0分析肝组织内HBVcccDNA含量与肝组织HBVtDNA定量、血清HBVDNA定量、HBsAg和HBeAg定量的关系。结果1、30例HBV携带者肝组织病理结果:GO/SO:9例,占30%;GO-1/SO-1:19例,占63.3%;G1-2/S1-2:1例,占3.3%,G1/S3:1例,占3.3%。2、肝组织中cccDNA定量与血清HBVtDNA定量的检测结果:HBVcccDNA定量:3.15×10~3拷贝/ml-1.06x10~7拷贝/ml(对数值:5.66±0.93);HBV总DNA定量:3.99x10~3拷贝/ml-6.26x10~8拷贝/ml(对数值7.45±0.18);肝组织cccDNA定量与组织HBVtDNA定量呈低度正相关,(r=0.375,p<0.05)。3、血清HBVDNA定量、HBsAg定量、HBeAg检测结果:血清HBVDNA定量:1.12×10~3拷贝/ml-6×10~8拷贝/ml(对数值:6.33±1.52),其中HBVDNA定量>10~6拷贝/ml定义为高载量,共19例,占65.5%;血清HBsAg定量均值:762±201.35IU/ml,血清HBeAg定量均值:1065.80±679.84IU/ml。肝组织cccDNA定量与血清HBVDNA无相关性(r=0.174,P>0.05)。肝组织cccDNA定量与血清HBsAg定量呈高度正相关(r=0.562,P<0.001);肝组织cccDNA定量与血清HBeAg定量无相关性(r=0.152,P>0.05)。结论1、年龄<40岁,ALT正常的HBV携带者尽管血清病毒水平很高,但其肝组织炎症及纤维化大部分在2级以下。2、在HBV携带者肝组织中,均可检测到cccDNA和HBVtDNA,HBV携带者肝组织内HBVtDNA和cccDNA水平相关性不强,不能通过肝组织内HBVtDNA定量水平直接推测肝内cccDNA定量水平。3、肝组织cccDNA定量与血清HBVDNA定量无相关性,不能通过血清HBVDNA定量水平来推测肝组织cccDNA定量水平,但肝组织cccDNA与血清HBsAg定量相关性较强,血清HBsAg定量可在一定程度上反映肝组织cccDNA定量的情况。
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