【摘 要】
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[研究背景和目的]:呼吸机相关性肺损伤(Ventilator-induced lung injury,VILI)是指在使用呼吸机治疗的过程中,由机械通气(Mechanical ventilation,MV)的诸多因素以及患者肺部原发疾病协同作用下所造成的急性肺组织损伤。MV是一把是双刃剑,它不仅可以治疗患者肺部疾病以及为治疗其他疾病提供保障,同时它也有可能在治疗过程中对机体(特别是肺脏)产生一系列
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[研究背景和目的]:呼吸机相关性肺损伤(Ventilator-induced lung injury,VILI)是指在使用呼吸机治疗的过程中,由机械通气(Mechanical ventilation,MV)的诸多因素以及患者肺部原发疾病协同作用下所造成的急性肺组织损伤。MV是一把是双刃剑,它不仅可以治疗患者肺部疾病以及为治疗其他疾病提供保障,同时它也有可能在治疗过程中对机体(特别是肺脏)产生一系列损伤。从1952年丹麦脊髓灰质炎大流行期间MV广泛应用以来,已有大量的学者研究VILI的的机制。VILI主要通过气压伤、容积伤、不张伤以及生物伤四种机制产生。其中生物伤在VILI的晚期起到了关键的作用,而生物伤其实就是促炎因子与促损伤细胞级联的激活。Wnt诱导的信号通路蛋白1(Wnt-induced secreted protein 1,Wisp 1)是Wnt信号通路下游的一个蛋白,在炎症、创伤修复等过程中起着重要作用。有研究报道,在炎症性肠病以及骨关节炎等多种炎症性疾病中,Wisp 1可以通过促进炎症因子的释放来促进其发生与发展。在本课题组前期研究中发现,在MV的过程中抑制非经典Wnt信号通路后,Wisp1的表达下调,呼吸机相关性肺损伤的严重程度减轻。但是对炎症因子、Wisp 1以及VILI三者之间的关系并未做进一步的探索。基于以上疑问,本课题通过构建VILI模型,并在肺损伤模型的基础上使用抗Wisp 1抗体,拟探讨Wisp1、炎症因子与VILI之间的关系。[方法]:15只雄性敏感性A/J小鼠被随机均匀分为对照组、中等潮气量(Moderate tidal volume,MTV)组、MTV+抗Wisp 1抗体组,(n=5),后两组为实验组,自主呼吸组为对照组。实验组行气管切开置管后行机械通气,呼吸机参数设置为:潮气量:12 m L/kg;呼吸频率:100次/分钟;呼气末正压:0;通气时间4小时。MTV+抗Wisp 1抗体组(0.5ug/g in 50ul PBS)在机械通气开始前气管内予以抗Wisp 1抗体。对照组行气管切开置管后自主呼吸4小时。实验组和对照组均吸入空气,并予以电热毯38℃左右对小鼠进行保温。实验结束后,取左侧肺组织使用苏木精-伊红染色法进行组织病理学评分。右侧肺组织使用酶联免疫吸附实验检测IL-1β、IL-6、TNF-α水平、蛋白免疫印迹法检测Wisp 1表达水平。[结果]:1.病理学结果显示:与自主呼吸组相比,MTV组肺组织病理学评分显著升高(p<0.05)。与MTV组相比,MTV+抗Wisp1抗体组肺组织病理学评分显著降低(p<0.01)。2.蛋白免疫印迹法结果显示:与自主呼吸组相比较,MTV中Wisp1的表达水平显著升高(p<0.05)。与MTV相比,MTV+抗Wisp1抗体组中Wisp 1的表达明显减少(p<0.01)。3.酶联免疫吸附实验结果显示,与自主呼吸组相比较,MTV组中炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)浓度显著升高(p<0.05)。与MTV组比较,在MTV+抗Wisp1抗体组中的炎症因子表达水平明显降低(p<0.05)。[结论]:Wisp 1参与了VILI损伤的形成,其机制与调节炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)的表达有关。
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