“红颊”草莓组培标准化与生物反应器扩繁及穴盘壮苗技术研究

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草莓(Fragariaananassa)为蔷薇科草莓属植物,是近年来被世界各地所广泛引种的重要经济作物。到目前,我国的草莓种植面积和产量均已成为世界第一。“红颊”草莓是我国民众喜爱的优质品种,但“红颊”草莓组培苗在质量与数量上仍不能满足农民的种植需求。本课题主要开展“红颊”草莓组培标准化与生物反应器扩繁及穴盘壮苗技术研究,以期为“红颊”草莓从组培苗生产到移栽种植提供完整的技术路线,为优质组培苗的规模化生产奠定基础。1.“红颊”草莓组培标准体系的建立:通过划分“红颊”草莓组培苗的生长时期,对组织培养过程激素组合和浓度的筛选,建立“红颊”草莓组培操作标准流程如下:匍匐茎茎尖75%酒精处理40s,升汞处理12min,通过解剖镜对剥离茎尖生长点后接种在MS培养基上。待培养15d后,将生长至“中苗期”的无污染、无损伤的外植体转接至MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.05mg/L+GA0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂6.0g/L,pH5.8的培养基上,进行丛生芽的诱导增殖。栽种季节,取“不定根生成期”的外植体接种在1/2MS+IBA0.4mg/L+蔗糖3%+琼脂6.0g/L+AC0.3g/L,pH5.8的培养基中,生根苗在培养25d后得到“成苗期”的组培苗,即可进行炼苗移栽。2.间歇浸没式生物反应器培养“红颊”草莓的研究:通过对生物反应器接种量比较实验,分析组培苗生物量、增殖系数、组培苗形态、叶绿素含量和总蛋白含量,获得了反应器培养“红颊”草莓的适宜参数设置,当接种量为40个/L时,反应器较适宜“红颊”草莓的培养,每个反应器培养得到的外植体平均增殖系数达到6.97,固体培养为6.03;反应器培养得到的平均每个外植体鲜重为4.14g,固体培养2.31g。3.“红颊”草莓穴盘壮苗技术研究及不同培养方式组培苗光合特性比较:通过穴盘的基质配比、相对含水量和肥料浓度三因素实验,以穴盘苗壮苗指数和外部形态为比较分析指标,获得了穴盘壮苗基质配比、相对含水量和肥料浓度的最佳参数组合:泥炭基质,相对含水量60%,MS大量元素母液500倍稀释液施肥时较适宜“红颊”草莓穴盘苗的生长。采用光合测定仪比较分析了反应器培养与固体培养方式下的组培苗穴盘炼苗期的光合特性。结果表明,反应器培养的草莓苗与传统组培的草莓苗在光合速率、蒸腾速率、气孔导度和叶胞间CO2浓度上在测定的前五天存在显著差异,相比于传统组培的草莓苗能更快速的适应外界环境。
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