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本文以开发利用桑黄这一新兴的药用菌物资源,探明其菌丝体生长所需条件(环境条件、营养条件)和测定几种胞外酶活性为目的,对桑黄的主要生物学特性进行测定,以正交试验确定了桑黄菌丝体生长所需的最适培养基,为桑黄的活性成分研究、开发新药及人工栽培桑黄子实体提供了科学依据;通过DNA测序技术等技术,确定三种桑黄菌种为火木层孔菌。主要结果如下:
1.环境条件对桑黄菌丝体的影响桑黄菌丝体能在10-34℃的温度条件下生长,菌丝体最适生长温度为28℃。3-5℃为菌种保藏最适温度。
在桑黄菌丝体生长过程中,给与适量的光照能促进菌丝体生长,但形成菌落比较稀疏,颜色较淡,呈绒毛状,而在黑暗条件下形成的菌落,菌丝浓密,颜色较深;当光照大于600Lx,光照抑制菌丝生长。
桑黄菌丝生长的最适pH为7。
液体深层培养条件下,最适装瓶量为500ml三角瓶装液量100ml,最适接种量为10%。
2.营养条件对桑黄菌丝体的影响通过桑黄菌丝体营养条件单因子筛选试验确定:最适碳源为玉米面和葡萄糖,最适氮源为酵母膏,最适无机盐为KH<,2>PO<,4>和MgSO<,4>·7H<,2>O。单因子正交试验筛选出适宜桑黄菌丝体生长的培养基为:葡萄糖3%,酵母膏0.3%,玉米面1%,磷酸二氢钾0.01%,硫酸镁0.05%。
3.胞外酶活性测定桑黄液体深层发酵过程中几种酶进行测定发现,多酚氧化酶和漆酶的活性比较低,而纤维素酶和蛋白酶的活性较高,在第7天左右活性最强。说明桑黄对淀粉类物质、纤维素类、木质素类物质均具有降解能力。
4.桑黄品种鉴定三菌株ITS片段序列与裂蹄层孔菌ITS片段序列同源性最近,ISSR标记显示三菌株可能为同一种菌株。通过对子实体和菌丝体显微结构进行观察,证明是火木层孔菌。