研究背景异烟肼具有很高的杀菌活性,是治疗结核病的核心药物,在预防结核病方面也起着至关重要的作用。可结核病患者对异烟肼单独的耐药性常被忽视,同时我国结核病耐药情况基线调查中显示的患者对异烟肼的高耐药性令人担忧。结核分枝杆菌十分容易产生耐药性,在治疗过程中常需要多种药物联合使用以提高治疗成功率。但绝大多数异烟肼耐药结核病（HR-TB）往往由于未被识别而使用世界卫生组织（WHO）推荐的普通标准方案进行治疗,对于此类患者该方案中所包含的异烟肼的杀菌效果将会大打折扣,因此可能导致更差的治疗结局。2018年WHO推荐在HR-TB的治疗方案中添加二线药物左氧氟沙星（Lfx）以提高治疗效果,但HR-TB对Lfx的耐药情况还未见报道。基于此,本研究通过比较异烟肼耐药结核病患者（HR-TB）与异烟肼敏感的结核病患者（HS-TB）在治疗转归上的差异以了解HR-TB与不良治疗结局之间的关系,并且收集从患者临床分离株中提取出的核酸进行分子分型实验以了解分枝杆菌的传播模式以及菌株基因型分布。并对复苏成功的HR-MTB进行Lfx的耐药性检测以了解我省HR-TB对二线药物Lfx的耐药情况。研究方法选择利福平敏感、异烟肼耐药的结核病患者作为耐药组患者（HR-TB）,根据耐药组患者的地区分布按比例选择利福平、异烟肼均敏感的患者作为对照组（HS-TB）。对两组患者在人口学信息、病情、治疗方案、治疗结局等方面进行比较分析,了解高龄、农民、结核病治疗史、肺空洞等危险因素与异烟肼耐药性之间的联系,以及HR-TB与HS-TB在治疗方案、治疗转归上的异同。收集从上述患者生物标本中提取出的核酸组成本研究中第二部分分子分型实验的样本库,使用24位点MIRU-VNTR和Spoligotyping分型实验对样本核酸进行基因分型,获得数字化结果后,在网站（http://www.miru-vntrplus.org）上进行聚类分析以了解两组菌株在成簇性及家族基因型分布上的异同。并将样本的分型结果与所对应的患者信息相结合,了解感染不同基因型菌株对患者的治疗结局的影响。对成功复苏的异烟肼耐药的结核分枝杆菌（HR-MTB）进行固体药敏培养实验检测其对Lfx的耐药性,了解我省HR-TB对Lfx的耐药水平。将Lfx的耐药信息与患者信息、菌株的分型结果相结合以了解年龄、性别、职业等因素对Lfx耐药性的影响以及我省Lfx耐药菌株的传播模式。本研究使用Excel 2019对数据进行预处理,然后将数据导入到SPSS 23.0中进行统计分析,应用卡方检验、Fisher精确概率进行组间比较,并应用多因素分析了解可能导致HR-TB发生不良治疗结局的危险因素,P<0.05认为差异有统计学意义。研究结果1.本研究共收集到120例HR-TB患者,根据地区信息按照1:1.5的比例抽取193例HS-TB患者。两组患者在年龄、性别、职业等人口学信息上的分布差异无统计学意义（P>0.05）;在初、复治患者、肺空洞、重症肺结核等病情方面的分布也无统计学差异（P>0.05）。两组患者使用WHO推荐标准治疗方案的比例相当,差异无统计学意义（P>0.05）。对患者治疗结局进行比较分析,发现HR-TB不良治疗结局发生率10.0%,其中治疗失败4例、转入耐多药结核病治疗2例、死亡6例;HS-TB不良治疗结局发生率3.6%,其中治疗失败1例、转入耐多药结核病治疗1例、死亡5例,两组患者不良治疗结局发生率有统计学差异（χ~2=5.271,P<0.05）,HR-TB发生不良治疗结局的危险度是HS-TB的2.95倍。在本研究进行期间HR-TB患者6人复发,复发率5.0%,HS-TB患者7人复发,复发率3.6%,经统计学检验两组患者复发率无统计学差异（χ~2=0.350,P>0.05）。对HR-TB发生不良治疗结局的危险因素进行分析,发现高龄、复治是导致不良治疗结局的危险因素,OR值分别为12.85,19.13。2.分子分型实验中共收集到80例HR-MTB的核酸、120例HS-MTB的核酸。经24位点MIRU-VNTR分型实验,HR-MTB成簇率为17.5%（14/80）,HS-MTB成簇率为16.7%（20/120）,两组菌株成簇率差异无统计学意义（χ~2=0.024,P>0.05）。成簇菌株中共有23例菌株表现出较强的时空联系,其中有两个耐药监测点表现出较高的近期传播率,分别为32.7%、13.5%。3.本研究中北京家族基因型菌株（Beijing-Family）是主要流行株,HR-MTB中占比83.9%,HS-MTB中占比80.0%,两组菌株中北京家族基因型菌株的比例相当。HR-MTB中感染北京家族基因型菌株的患者不良治疗结局发生率为13.8%,感染非北京家族菌株的患者均未出现不良治疗结局;HS-MTB中北京家族菌株不良治疗结局发生率为1.1%,非北京家族菌株发生率为4.3%,差异均未显示统计学意义（P>0.05）。HR-MTB中感染北京家族菌株的患者与感染非北京家族菌株的患者复发率均为7.7%,HS-MTB中复发率分别为8.8%、4.3%,差异也无统计学意义（P>0.05）。本研究中24位点MIRU-VNTR对所有菌株的分辨率为0.9972,Spoligotyping分辨率为0.4276,Spoligotyping分型方法的分辨率低于MIRU-VNTR。4.本研究成功复苏64例HR-MTB,经过固体药敏培养实验显示对Lfx的耐药率为21.9%。将Lfx的耐药信息与菌株基因型相结合,结果显示有一半以上的Lfx耐药结核病是由近期传播引起。研究结论1.本研究中患者年龄、性别、职业等因素均与异烟肼耐药性无统计学联系,并且HR-TB在治疗过程中使用的治疗方案与HS-TB相似。使用标准治疗方案的HR-TB患者更容易发生不良治疗结局（治疗失败、转为耐多药结核病、死亡）,但复发率与HS-TB无差异。2.24位点MIRU-VNTR的分辨率高于Spoligotyping分型实验,两种分型方法联合使用能够达到更好的分型效果。本研究中北京家族基因型菌株为主要流行株,占比81.5%,但北京家族基因型与菌株对异烟肼的耐药性无统计学联系,也不是影响患者的治疗转归的危险因素。3.江苏省HR-TB对Lfx的耐药率较高,为21.9%,并且Lfx耐药菌株中有一半以上可能是由于近期传播导致,提示我省结核病防控工作应重视HR-TB患者中近期传播的问题。