论文部分内容阅读
植物激素是植物体内天然存在的一系列有机化合物,对植物生命活动的各个环节、过程起重要的调节作用。传统的分析技术难以对植物激素进行方便、快速的测定。研究高灵敏度、简便、快速、可靠的植物激素测定方法对植物激素的研究和农业生产具有重要的意义。 本文以牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白合成了β-吲哚乙酸(IAA)、异戊烯基腺嘌呤(iPA)、赤霉酸(GA3)三种植物激素的完全抗原,通过在家兔体内免疫获得相戍的激素抗体,采用不同生物分子的固定化方法,设计了一些新的传感器件,发展了几种电流型免疫传感器、酶传感器以及压电免疫传感器,将它们用于植物的内源激素类物质IAA、iPA、GA3以及H2O2的测定。主要内容包括: 1.设计了3种测定IAA的免疫传感器:(1)基于质量放大原理,采用竞争免疫反应,设计成压电免疫传感器实现对小分子植物激素的测定,测定范围为0.5ng/ml~5μg/ml液相样品中的IAA。(2)基于微金电极表面巯基自组装设计成测定IAA的安培免疫传感器,测定范围为5.68×10-7~2.83×10-5mol/l,这种传感器能测定绿豆芽提出液中的IAA的浓度。(3)以褐藻酸钠对硅溶胶-凝胶碳糊电极改性,提高了电极表面的负电性,通过静电吸附进行电极表面的免疫组装,以HRP标记的抗原为识别抗原、以H2O2-TMB为酶联安培测定的反应底物,设计成功基于褐藻酸钠-硅溶胶-凝胶碳糊电极(SACE)表面静电吸附免疫自组装的安培免疫传感器,用于测定IAA的含量,测定范围为5μg/ml~500μg/ml。 2.iPA免疫传感器:基于电聚合膜修饰,采用双酶催化,设计成功测定细胞分裂素iPA的安培免疫传感器,其测定范同为5μg/ml~300μg/ml。 3.GAs免疫传感器:基于铜离子标记抗原,采用方波溶出伏安法设计成功测定赤霉酸的电化学传感器,测定范围为1μg/ml~150μg/ml。上述免疫传感器能用于测定杂交水稻样品中IAA、i队、GAs的含量,测定结果与HPLC、ELISA法一致,因而具有重要的实用价值。 4.研究了2种H20:酶传感器:(1)基于Nafion膜固定电子传导介质二茂铁,以戊二醛交联法固定HRP,设计成用于测定HZO:的生物传感器:(2)设计了基于纳米金/聚间苯二胺膜修饰的HZO:的生物传感器,其测定范围为1.34只10一“一1.76又10一4mol/l。采用这种传感器对9种植物的叶片提取液的样品进行了测定,结果与光谱法测定的结果一致。