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电化学葡萄糖生物传感器在许多领域得到广泛应用。在其研究中,葡萄糖氧化酶(GOD)的固定化是一个关键问题。开发适宜的酶固定基体及相应的固定方法制备GOD膜,实现有效保持酶的活性,并准确检测葡萄糖,对于葡萄糖生物传感器的发展具有重要的意义。本文采用硝酸纤维素膜和聚碳酸酯膜为基体,以交联法固定GOD,构筑葡萄糖生物传感器,并研究了其对葡萄糖的检测性能。论文包括以下两部分内容:1.以硝酸纤维素膜(Φ10mm)为基体,采用戊二醛交联法固定GOD,制成酶膜。通过红外光谱(FTIR)检测来确定GOD固定机理,研究发现GOD以共价键固定在硝酸纤维素基体膜上。通过测定不同制备条件下酶膜的活性,确定酶膜的最佳制备条件为:戊二醛溶液浓度为2.5%(v/v),磷酸缓冲溶液(PBS)的pH值为6.5,GOD溶液浓度为10g-L-1。实验研制的GOD膜对p-D-葡萄糖具有良好响应,灵敏度为1.1μA·mmol-1,线性范围为0.05-4.0mmol·L-1,响应时间为80-100s,表观米氏常数为7.2mmol·L-1,酶膜对p-D-葡萄糖表现出良好的亲和性。同时GOD膜具有良好的选择性、重现性、操作稳定性和贮存稳定性。将酶膜应用于实际发酵样品中的葡萄糖浓度检测,与光谱法检测结果基本相符。将酶膜安装于市售生物传感分析仪中,酶膜对底物响应快速,线性和稳定性良好,且热稳定性高、抗干扰性强。2.实验采用滴涂法,将GOD溶液滴涂于聚碳酸酯基体膜(Φ10mm)表面,并通过戊二醛蒸气交联固定制成GOD膜,最佳制备条件为滴涂浓度为5g·L-1的GOD溶液4μL。GOD膜对葡萄糖具有十分快速的响应,响应时间为20s,线性范围为0.1-2.5mmol·L-1,灵敏度为1.32μnA·L·mmol-1。表观米氏常数为141.95mmol·L-1.然而酶膜的选择性还有待改善。将酶膜安装于市售生物传感分析仪中,酶膜对底物响应快速,线性、稳定性及选择性良好。