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本研究应用现代生物技术,开展了西红柿抗叶枯病基因Pto植物表达载体的构建工作,建立起应用根癌农杆菌介导法对尾叶桉杂种无性系GU1和DH33-9进行遗传转化的实验平台,为Pto基因遗传转化尾叶桉或尾叶桉杂种,培育抗青枯病的基因工程苗准备了条件。
首先构建了Pto基因植物表达载体,然后建立了桉树无菌芽转化受体系统,最后建立了桉树无菌叶盘转化受体系统的组培条件:从桉树组织培养的小苗上切取叶盘为材料,以改良H为基本培养基,探讨培养基中适宜叶盘愈伤组织诱导及其继代培养的细胞分裂素KT、生长素2,4-D和蔗糖的浓度。适宜叶盘愈伤组织诱导的蔗糖浓度为30g/L,成熟叶片诱导愈伤组织效果最好。叶盘在附加KT 0.25mg/L的培养基上预培养两天,可抑制愈伤组织发根。