芽孢杆菌有氧发酵豆相替代鱼粉对大口黑鲈(Micropterus salmoides)幼鱼生长、肠道健康和免疫能力的影响

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1.芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈幼鱼生长、饲料利用和消化酶活力的影响为研究发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈生长、饲料效率、表观消化率和消化酶活力的影响,以枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代部分鱼粉配置5组等氮、等能的实验饲料。发酵豆粕的添加量为0%(FM组)、10%(FSM10组)、15%(FSM20组)、20%(FSM30组)、25%(FSM40组),分别替代0%、10%、20%、30%、40%的鱼粉。初始体质量(19.83±0.33)g的大口黑鲈,试验设计成5组,3平行,每平行大口黑鲈30尾,每天饲喂2次(7:00和17:00),养殖75d。结果显示:(1)各组饵料效益无显著差异(P>0.05),FSM20和FSM30组均末重、WGR和SGR显著高于其他组(P<0.05);蛋白质效率无显著性差异(P>0.05),FSM组摄食量显著高于FM组,FSM40组蛋白和脂肪沉积率显著低于其他组(P<0.05);全鱼粗蛋白在FSM20组出现最大值,但无差异性;FSM组的全鱼粗脂肪显著低于FM组;各组之间的蛋白质消化率和脂肪消化率无显著性差异(P>0.05),FSM30和FSM40的干物质表观消化率显著低于其他组(P<0.05);各组肥满度之间未出现差异性,肝体比与脏体比呈下降变化趋势,各组肝体比未出现差异性(P>0.05),但FSM30和FSM40组脏体比显著低于其它组(P<0.05);(2)低于20%(FSM20组)替代,FSM组与FM组的消化酶活力无显著差异(P>0.05)。综上所述,枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代20%(FSM20组)鱼粉时对大口黑鲈幼鱼的生长性能、饲料利用和消化酶活力最为有利。2.枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈幼鱼肠道切片、肠道微生物和肠道炎性因子表达量的影响为研究枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代鱼粉后,大口黑鲈幼鱼肠道健康是否会受到影响,对FM组、FSM10组、FSM20组、FSM30组和FSM40组的肠道切片形态与结构和肠道炎性因子基因表达量以及FM组、FSM10组、FSM20组和FSM40组的肠道微生物三个角度进行试验。试验结果显示:(1)随着发酵豆粕替代水平的增加,前肠肌层厚度显著降低,各组绒毛长度和绒毛宽度都显著高于高于FM组;FM组中肠肌层厚度显著高于其它组,绒毛长度除FSM10组外,FM组显著高于其它替代组(P<0.05);后肠肌层厚度FSM20和FSM30组显著高于FM组,其它实验组显著低于FM组,FM组的绒毛长度和绒毛宽度显著低于其它实验组(P<0.05);(2)在肠道微生物覆盖率趋于1的前提下,随着发酵豆粕替代水平的提高,物种丰富度呈上升变化,在FSM40组时显著高于FM组(P<0.05);低于15%替代(FSM20组)时,FSM组与FM组肠道菌群之间有较高的相似性;各试验组大口黑鲈肠道中无壁菌门、变形菌门和梭杆菌门保持动态平衡,维护肠道稳定;在属水平上不动杆菌属随替代水平升高而变高,鲸杆菌属含量不断降低。(3)各组促炎因子相对表达量呈现先降低后提升的变化,普遍在FSM20组存在最低值,超过FSM20组IL-8和TNF-α表达量显著高于FM(P<0.05);抗炎因子相对表达量皆呈现逐步提高的趋势变化,超过FSM20组抗炎症因子基因表达量显著高于FM(P<0.05)。综上所述,在发酵豆粕替代20%鱼粉的情况下大口黑鲈肠道健康不会受到影响,此时FSM组的肠道切片结构受影响较小,FSM组与FM组的肠道微生物结构相似性较高,炎性因子的平衡也未被打破。3.枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈幼鱼免疫能力的影响为研究枯草芽孢杆菌有氧发酵豆粕替代鱼粉对大口黑鲈幼鱼免疫能力的影响,对FM组、FSM10组、FSM20组、FSM30组和FSM40组大口黑鲈的血清生化指标、肝脏免疫指标和肝脏切片结构进行试验,并在养殖试验结束后进行嗜水气单胞菌感染实验。试验结构显示:(1)血清中白蛋白随发酵豆粕替代水平的增加呈现先上升后下降的变化趋势,在FSM20组出现最大值,无显著差异(P>0.05);FSM20和FSM30组血清球蛋白含量显著高于FM组;除FSM40组外,其它各组的总蛋白皆显著高于FM组(P<0.05);血清中谷丙转氨酶与谷草转氨酶随替代水平增加而提高,两者在FSM10组时与FM组无显著差异(P>0.05);FSM的碱性磷酸酶显著高于FM组(P<0.05);FSM30和FSM40组的超氧化物歧化酶活力显著高于FM组(P<0.05),丙二醛活力呈现下降变化,在FSM40组显著低于FM组,FSM40组的溶菌酶活力显著高于FM组(P<0.05);(2)FM组肝细胞结构完整,排列有序,细胞膜界限明显;FSM10和FSM20组细胞肿大,微量细胞的细胞核溶解,出现空泡现象;FSM30组空泡现象越来越多,肝细胞内脂肪堆积,细胞核位置发生偏移;FSM40组大量细胞细胞核溶解,细胞与细胞之间的界限开始消失;(3)FM和FSM10组在24h时出现死亡率,其他各组在18时就出现死亡率且FSM40组死亡率最高;在同一时间段内,大口黑鲈攻毒后死亡率随替代水平的提高而增加;FSM30和FSM40组死亡率最终稳定在83.33%。综上所述,枯草芽孢杆菌替代20%鱼粉时对大口黑鲈幼鱼免疫能力影响最小。
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