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从1979年日本学者远腾章发现红色红曲霉(M.ruber)产生强降胆固醇物MonacolinK之后,国内外学者掀起了降脂红曲霉的研究热潮,它的药用价值开始逐渐得到人们的重视。1987年美国默沙东(MERCK)开发出新一代降胆固醇的药物美降脂,随后美国和日本又开发出一系列的他汀类药物。但是我国对降脂红曲霉的研究相对落后,1996年我国才首次生产洛伐他汀原料药及其片剂。目前我国降胆固醇功能红曲霉的生产还是普遍存在产量偏低、生产成本偏高等问题。究其原因,一方面是培养工艺的不足,另一方面是缺乏优良的红曲霉菌株,再有一方面就是以大米为原料。因此进行红曲霉菌株的筛选研究和采用廉价的基质来培养,尽可能地降低Lovastatin成本,具有非常重要的现实意义。本试验研究的主要目的是对红曲霉菌株进行了筛选,确定了相对高产Lovastatin的高产菌株;采用农副产品—麦麸来代替大米为基质;并研究以麦麸为基质生产和提取Lovastatin的工艺。
通过筛选实验室保藏的5个菌株,确定了相对高产Lovastatin的菌株M5菌株作为研究对象。
利用紫外分光光度计对其进行检测,确定了最佳的提取和检测溶剂。
对发酵过程中的不同因素:不同时间、不同温度、不同基质厚度,培养基含水量的不同,不同的培养基起始pH值,不同的接种量,不同的分批加水量、加水pH的不同,分别进行培养,选取对其产量影响较大的四个因素,再对这四个因素做正交实验,确定最佳的培养条件为:培养基的起始pH值为6.0,在35℃的恒温培养箱中,从第3天起,每天补充水2.5ml,培养11天。
对提取过程中的不同因素:不同时间、不同温度、不同的pH值、不同的提取溶剂,不同的离心机转速这几个因素,做单因素试验,选取对其产量影响较大的四个因素做正交试验,确定最佳的提取条件为:溶剂为75﹪的乙醇,pH为5.0,温度30℃,时间3h。
在提取Lovastatin的过程中,还可提取红曲色素,作为副产品。充分地利用了农副产品—麦麸。通过单因素试验,确定了提取红曲色素的最佳条件:溶剂70﹪的乙醇,pH值为4.0,温度为60℃,时间为2h。