【摘 要】
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ω3(Omega-3 fatty acid desaturase)、CBF3(C-repeat binding factor)、AtGoLS3(Arabidopsis thaliana Galactionol synthase 3)是3个抗寒相关基因。拟南芥(Arabidopsis tha
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ω3(Omega-3 fatty acid desaturase)、CBF3(C-repeat binding factor)、AtGoLS3(Arabidopsis thaliana Galactionol synthase 3)是3个抗寒相关基因。拟南芥(Arabidopsis thaliana)ω3脱饱和酶基因,通过多聚不饱和脂肪酸生物合成途径,催化前体脱饱和磷脂酰胆碱和其他酯磷脂形成不饱和脂肪酸,即把18∶2脱饱和形成18∶3。ω3功能区分析揭示,其功能域是一个富组氨酸域,能与金属离子结合。CBF3是转录活性因子,特异结合在DNA反式调空元件DRE,DRE包含COR基因簇,通过CBF3的不断超量表达来诱导COR基因表达。CBF3包含一个核定位信号(NLS)域和一个酸性域。AtGoLS3是肌醇半乳糖苷合成酶,当植物受到逆境胁迫的时候,棉子糖和肌醇半乳糖苷就会超量表达。 本研究从低温诱导的模式植物拟南芥中提取总RNA,根据GenBank中ω3、CBF3、AtGoLS3的cDNA序列分别从起始密码子到终止密码子设计引物,通过RT-PCR方法分离拟南芥ω3、CBF3、AtGoLS3,经测序和同源性比较,与GenBank中的这三个基因的编码序列同源性为100%。ω3编码序列为1064bp,CBF3编码序列为861bp,AtGoLS3编码序列为1012bp。在此基础上,构建了35S-pGreenⅡ0029-ω3植物表达载体。通过农杆菌GV3103介导转化拟南芥和热研5号柱花草,最终获得能在卡那霉素上生长的拟南芥转化植株和能在卡那霉素上生长的热研5号柱花草愈伤组织。
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