聚合物胶束包载普拉洛芬用于眼部递药的研究

来源 :宁波大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshi8848
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:制备聚丙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯三嵌段共聚物(Poly(L-Lactide)-b-Poly(Ethylen Glycol)-b-Poly(L-Lactide),PLEL),将此作为载体,包载非甾体类抗炎药普拉洛芬(Pranoprofen,PF),形成纳米载药体系,并对普拉洛芬纳米颗粒(Pranoprofen nanoparticles,PF NPs)进行表征。然后在细胞和动物层面上探索该纳米载药体系对眼部的毒副作用和眼部炎症的治疗效果。方法:选用左旋丙交酯(L-Lactide,LLA)和聚乙二醇(Poly(Ethylen Glycol),PEG)作为反应物用于合成三嵌段聚合物PLEL。将反应物投入到三颈烧瓶中,并将此放在油浴锅中,反应温度为130℃,催化剂选择辛酸亚锡。当反应24h后,终止反应,用二氯甲烷溶解产物,并用无水乙醇提纯产物。PLEL的分子结构和分子量由傅里叶变换红外光谱仪、氢核磁共振谱仪和凝胶渗透色谱仪检测得到。采用乳化溶剂挥发法合成PF NPs,其形貌和粒径分布分别通过透射电镜和动态光散射仪检测得到。芘荧光探针法将被用来检测纳米颗粒的临界聚合浓度。PF NPs的包封率、载药率以及体外释放规律均通过紫外分光光度计检测得到。为了检测PF NPs的神经毒性以及对眼表细胞的毒性作用,我们进行了体外细胞实验。我们选取了 B4G12人角膜内皮细胞(B4G12 human corneal endothelial cells,HCEC-B4G12)和 BV2 神经胶质细胞(BV2 microglia cells)进行实验,通过细胞增殖活性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK8)检测细胞存活率。为了将PF NPs真正用于眼部抗炎,我们必须明确PF NPs对眼表是否有刺激作用,因此我们开展了短效眼部刺激试验和长效眼部刺激试验,明确PF NPs的安全性。为了明确PF NPs的抗炎效果,我们进行了动物层面的研究。通过前房内注射0.2mg/mL脂多糖溶液,我们建立了眼表炎症模型。PF NPs被制作成滴眼液,应用于眼表,探究其对于眼部炎症的治疗效果。结果:三嵌段聚合物PLEL通过傅里叶变换红外光谱仪和氢核磁共振谱仪的检测,明确了其分子结构,同时也证实PLEL的成功合成。PLEL的分子量经凝胶渗透色谱检测为20.8KDa,且相对分子量分布曲线为单峰,间距较窄,说明产物比较纯净,没有杂质。我们采用乳化溶剂挥发法成功合成PF NPs,平均粒径为151.7±5.87 nm。透射电镜观察下,颗粒呈球形且表面光滑。PF NPs的临界聚合浓度为3.06 × 10-3 g·L-1,说明其具有较高的结构稳定性和较强的抗稀释能力。PF NPs的包封率(%)为72.3±5.62%,载药率(%)为6.98±0.53%。PF NPs的体外释放曲线呈现出一个初始爆发,然后持续、缓慢释放的特性,累积释放长达20天。与PF NPs相反,单纯PF的释放速度要快得多,透析后6 h即有82%的药物渗出。体外细胞实验证实了PLEL良好的细胞相容性,对HCEC-B4G12和BV2神经胶质细胞的存活率没有影响;进一步实验表明PF NPs能够降低PF原本所具有的毒性,这可能与药物缓慢释放有关。在眼部刺激试验中,PF NPs表现出良好的生物相容性,对眼表没有任何的刺激作用,而长期使用PF则会造成眼部的轻微发红。在眼部抗炎实验中,PF NPs表现出良好的抗炎作用,在相同给药次数下,PF NPs比 PF更能加快眼部炎症的消除。结论:本研究采用乳化溶剂蒸发法制备了平均粒径为151.7±5.87 nm、表面光滑的PF NPs,旨在提高局部给药的生物利用度。作为纳米颗粒载体,PLEL共聚物无神经毒性和眼部毒性,对眼部的刺激作用小,这归因于共聚物分子中具有生物相容性较好的PLLA和亲水性极佳的PEG组分。PF被封装在两亲性聚合物PLEL形成球形纳米粒子后,原来疏水性的PF可以均匀分散到溶液中形成稳定的悬浮液,在眼部用药时,这被认为是有助于减少药物清除率,提高细胞吸收率,提高生物利用度。与纯PF药物相比,PF NPs对眼细胞和眼睛的伤害较小并且表现出长达5天的持续药物释放,这对于长期抗炎和低给药频率非常有用。体内试验的结果证明了这一假设,结果表明,PF NPs对感染眼的抗炎作用优于单纯的PF。因此,我们得出结论,与纯PF相比,PF NPs更安全,抗炎效果更持久,这证明它是一种有希望在未来缓解眼部前炎症和术后疼痛的眼科新疗法。然而,PEG含量对聚合物理化性质和抗炎作用的影响仍需进一步研究。
其他文献
随着电子通信、国防科技等领域的发展,各种电子器件的工作频率趋于高频化,千兆赫(GHz)频率器件的应用是一个大趋势,但高频(GHz)条件下的电磁波污染成为一个严重的问题。解决电磁波污染的主要的方法是采用吸波材料。由于受到Snoek极限的限制,传统磁性材料如铁氧体和金属材料的性能受到限制,其磁导率和自然共振频率的乘积受限制于材料本身的饱和磁化强度,在高频下表现较低的磁导率,这很大程度上限制了高频高性能
学位
生物检测在生物体中内环境的离子、分子等含量水平的检测十分重要,相应水平含量范围的稳态可以对生物体状态情况进行有效的评估。此外,对生物体内的生物物质的水平含量的监测也至关重要,它们是维持生物体系统平衡和功能正常运行必不可少的部分。当生物体内物质的水平含量出现异常时,生物体可能会出现病变,尤其是针对于与疾病密切相关的物质的检测对生物体早期疾病的诊断具有很大的引导作用。目前,癌症、糖尿病、炎症、阿尔兹海
学位
目的:探讨脱细胞异体神经支架连接到受损神经联合阿霉素神经干注射的疗法对创伤性痛性神经瘤的防治作用及作用机制。方法:首先以SD大鼠坐骨神经为来源,采用化学萃取方法制备脱细胞异体神经支架(ANAS),通过HE和髓鞘染色检测评估异体神经支架脱细胞情况;其次,健康SD雌性大鼠80只,随机分为四组,每组20只。四组处理如下:对照组:坐骨神经切断后,无特殊处理;阿霉素组(D0X组):坐骨神经切断后,残端近端注
学位
肿瘤坏死因子受体11B(tumor necrosis factor receptor 11B,TNFR11B)是重要的细胞因子受体,其能参与机体免疫应答,调控细胞的炎症、凋亡与分化等。本研究中,我们克隆了大黄鱼(Larimichthys crocea)Lc TNFR11B的c DNA序列,并对溶藻弧菌感染后Lc TNFR11B的组织表达、免疫应答及其对MO/MΦ的抗溶藻弧菌作用的调控进行了探究。L
学位
香鱼(Plecoglossus altivelis)为洄游性一年生鱼类,海水育苗,淡水养殖。其肉质细嫩,气味清甜,被视为水中珍品。但是其性别决定机制知之甚少。全基因组测序技术能够全面、精确地分析基因组的碱基序列,从而破解其所包含的信息,揭示基因组的复杂性、多样性。IIB型限制性核酸内切酶位点相关的DNA测序(type IIB restriction endonuclease site-relate
学位
研究目的喉癌是耳鼻咽喉头颈外科第三大恶性肿瘤,病理类型以喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)为主。由于早期症状不明显,患者就诊时往往处于中晚期,从而错过最佳治疗时期。尽管在手术、放疗及化疗等治疗方法上已取得较大进展,但喉癌患者总体存活期未见明显提高,且生活质量欠佳。因此,寻找新型、安全高效的特异性喉癌标志物显得十分重要。转移RNA(trans
学位
研究目的反复自然流产(Recurrent spontaneous abortion,RSA)指与同一性伴侣连续发生2次及2次以上的自然流产,是一个重要的生殖健康问题。RSA是导致妇女不育的原因之一,给孕妇及其家庭带来巨大的精神痛苦和经济压力,但目前仍没有已经证实的确切的发病机制。腺苷是重要的免疫抑制分子和控制血管新生的调节因子,其合成及作用受CD39和CD73的影响,且有研究提出异常的蜕膜免疫微环
学位
近年来,稀土掺杂发光材料因其在阴极射线管、等离子体显示屏、发光二极管、场发射显示器、温度传感等领域的应用而备受关注。在发光二极管(LEDs)中,白光发光二极管(W–LED)作为一种节能、环保的通用照明器件,具有发光效率高,亮度高,功耗低,运行时间长,稳定性好的优点。产生白光的主要策略是将LED芯片与适当的荧光粉相结合。因此,寻找新型荧光粉对W–LED的发展具有至关重要的作用。本文通过高温固相烧结法
学位
研究目的结直肠癌(colorectal cancer,CRC)作为一类恶性肿瘤极大地影响了世界人民的生命健康和生活质量,一直是临床上亟待解决的难题。然而,因为缺少早期诊断的特异性生物标志物,许多患者被确诊为CRC时肿瘤已发生扩散或转移。因此,寻找新型的生物标志物,研究CRC发生发展的分子机制对结直肠癌的早诊断、早治疗有着重要作用。研究表明,环状RNA(circular RNA,circRNA)参与
学位
目的:本研究通过观察类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)病人和健康人是否存在血清脂肪酸的差异,并探讨n-3多不饱和脂肪酸对大鼠佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)模型Treg/Th17及相关免疫因子的影响,旨在阐明n-3多不饱和脂肪酸对佐剂性关节炎的抗炎作用及相关机制,为防治类风湿性关节炎提供实验数据和理论依据。方法:1.病例组选取类风湿性关节炎病
学位